银杏内酯B对内皮祖细胞的保护作用及机制研究论文.pdfVIP

温卅I医学院硕士学位论文 银杏内酯B对内皮祖细胞的保护作用及机制研究 中文摘要 low 目的：观察银杏内酯B(GinkolideB，GB)对氧化低密度脂蛋白(oxidized density progenitor cells，EPCs)功能的影响，并探讨其可能的保护机制。 方法：密度梯度离心法获取脐血单个核细胞，以5x106／cm2密度接种细胞 到事先包被纤维连接蛋白的培养皿，加入含20％胎牛血清的EBM一2培养液，培 养三天后，以培养液洗去未贴壁细胞后得到贴壁细胞，继续原条件培养、扩增、 分化。培养7 标记的荆豆凝集素I(FITC-UEA-Ilectin)双染实验及Ⅷ因子相关抗原免疫组化 鉴定内皮祖细胞。收集贴壁细胞并随机分为对照组，氧化低密度脂蛋白组(50 ug·mL。1)及银杏内酯B干预组(氧化低密度脂蛋白50ug·mL_l加银杏内酯B，浓 度分为50，100和150ug·mL。1)，干预24h后分别采用CCK8比色法、黏附能 力测定实验、改良Boyden小室法观察EPCs的增殖能力、黏附能力和迁移能力， BP65 并取各组细胞裂解液行实时荧光定量PCR检测NF-KmRNA的表达量。 结果：人脐血单个核细胞培养三天后，形成典型内皮祖细胞样集落，培养第7 天贴壁细胞DiI—ac—LDL和FITC—UEA—Ilectin双染实验阳性，荧光显微镜下发 红色及绿色荧光。Ⅷ因子相关抗原免疫组化阳性，胞浆呈棕黄色。氧化低密度脂 VS 蛋白损伤后，EPCs的增殖能力(0．700±0．0461．119±0．031，尺O．01)、 VS VS 黏附能力(16．3±3．227．9±5．1，尺0．01)，迁移能力(19．8±3．4 BP65 mRNA表达量 38．3±2．6，尺0．01)显著受损，细胞裂解液NF—K VS VS VS19．8±3．4，P均0．05)，细胞保护作用随银杏内酯B的浓度升高而增强， BP65 且银杏内酯B各组NF—K mRNA表达量随银杏内酯B浓度升高而显著减少 (1．437±0．1lO，1．587±0．091，2．707±0．127倍，尸均0．05)。 结论：1．银杏内酯B对氧化低密度脂蛋白损伤后内皮祖细胞的功能有显著 保护作用。 BP65 2．银杏内酯B对内皮祖细胞的保护作用机制可能与抑制NF—K mRNA的表达有关。 温州医学院硕士学位论文 B；P65 关键词：银杏内酯B；内皮祖细胞；氧化低密度脂蛋白；NF—K GinkolideB endothelial protects progenitor cells oxidized impairedby low-densitylipoprotein Absract this examinedthe effectsofGinkolideBonin-vitro Objective：Instudy，we