小鼠抑郁模型海马中tau蛋白磷酸化及对线粒体轴浆运输影响.pdfVIP

摘 要 摘 要 Tau蛋白是一种微管相关蛋白，其磷酸化受到严格调控，在神经元中和轴浆 运输密切相关。据研究报道，急性应激中，啮齿类动物海马中tau蛋白的磷酸化 和下丘脑-垂体- 肾上腺（Hypothalamo-Pituitary-Adrenal,HPA）轴的过度激活密切 相关。而在抑郁病人中，HPA轴的过度激活是基本的特征之一。因此，在抑郁 症中，tau蛋白的磷酸化情况以及和轴浆运输的关系需要进一步研究。我们的假 设是：在抑郁模型中，HPA轴的过度激活会引起tau蛋白的过度磷酸化并进一步 影响到轴浆运输。 为验证该假设，我们首先建立了母子剥夺抑郁模型，对其进行了行为学测 试，并检测了HPA轴活性。然后检测了海马中tau蛋白的磷酸化水平。为了研究 轴浆运输的变化，我们选择了检测海马突触体中线粒体水平的变化。结合CRH （Corticotropin-Releasing Hormone ，CRH）受体1 （CRH Receptor1,CRHR1 ）和 糖皮质激素受体 （Glucocorticoid Receptor,GR）的拮抗剂，研究了CRH直接的中 枢作用机制和HPA轴的反馈机制在tau蛋白磷酸化和线粒体运输中的作用，。为 了进一步检测tau蛋白磷酸化和线粒体运输的关系，我们用实时成像技术，观察 当原代神经元中tau蛋白磷酸化水平发生变化时线粒体运输的动态变化。结果发 现： 1. 母子剥夺抑郁模型具有典型的抑郁样行为和过度激活的HPA轴。 在旷场、糖水偏好和明暗箱行为学测试中，抑郁模型具有典型的抑郁样行 为。和对照组相比，抑郁模型具有显著升高的血浆cortitosterone 和下丘脑 CRH mRNA水平。 2. 抑郁模型海马中tau蛋白的磷酸化水平显著升高。 和对照组相比，抑郁鼠的海马中tau蛋白的总表达水平没有显著变化，但在 在AT-8磷酸化位点显著升高，在tau- 1非磷酸化位点显著降低。 3. 抑郁模型海马突触体中的线粒体水平显著升高。 和对照组相比，抑郁模型海马突触体中的线粒体水平显著升高。 4. CRHR1而不是GR介导了tau蛋白的磷酸化水平升高和突触体中线粒体水平的 升高。 CRHR1 的拮抗剂CP154526能显著降低tau蛋白的磷酸化，并能恢复突触体中 线粒体的水平，而GR的拮抗剂RU486却没有这些作用。 I 摘 要 5. 在原代神经元中，当tau蛋白磷酸化水平降低时，线粒体的轴浆运输水平下调。 我们用锂盐抑制Gsk3beta 的活性从而降低原代神经元中tau蛋白的磷酸化水 平，我们观察到线粒体的轴浆运输水平显著下降。 上述结果表明，在抑郁模型中CRHR1介导了tau蛋白的过度磷酸化，同时伴 随着突触体中线粒体水平的升高。这向我们揭示，在抑郁模型中，CRH的中枢 作用参与了线粒体运输的调控，这可能为研究抑郁发病机制提出了一条新思路。 关键词：抑郁(Depression) 母子剥夺（Maternal Deprivation ） tau 线粒体 （Mitochondria ） CRH （Corticotropin-Releasing Hormone ）HPA （Hypothalamo-Pituitary-Adrenal） II Abstract Abstract Corticotropin-releasing hormone (CRH) is considered as the driving force for hypothalamo-pituitary-adrenal (HPA) axis and play an important