生物化学 教学课件 作者 李玉白 主编 第2章 蛋白质化学.ppt

尚辅网 尚辅网 第二章 蛋白质化学 第二章 蛋白质的化学 第一节 蛋白质的化学组成 一 蛋白质的分子组成 (一) 蛋白质的元素组成 含氮量接近，平均值为 16% 。 (二)蛋白质的基本组成单位----氨基酸 凡分子中含-NH2和-COOH的物质，称AA 二、基本氨基酸的分类 胰岛素一级结构 蛋白质的空间结构 一级结构 AA的种类、排列顺序 肽键 主键 二级结构 多肽链折叠、盘曲形成的 空间结构，如：α-螺旋 氢键 β-折叠、β转角 盐键 副键 三级结构 在二级结构的基础上，进一 疏水键 步折叠、盘曲 范德华力 四级结构 三级结构的聚合 蛋白质的分子结构层次 一级结构(primary structure) 正常红细胞与镰刀形红细胞的扫描电镜图 氨基酸是两性电解质，其解离程度取决于所处溶液的酸碱度。 等电点(isoelectric point, pI) 在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。 氨基酸等电点的特点： 1.净电荷数等于零，在电场中不移动； 2.此时氨基酸的溶解度最小。 三 、蛋白质的理化性质 (一) Pr是两性电解质 兼性离子：Pr离子在某一PH值溶液中所带正、负电荷量相等时，称为兼性离子。 Pr的等电点： Pr以兼性离子状态存在时溶液的PH值。 盐析(salt precipitation)是将高浓度硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐加入蛋白质溶液，使蛋白质表面水化膜被破坏，导致蛋白质沉淀。 *分段盐析：调节盐浓度，可使混合蛋白质溶液中的几 种蛋白质分段析出。 例如：血清球蛋白（50%(NH4)2SO4饱和度）， 清蛋白（饱和(NH4)2SO4)。  蛋白质结构 概 念 维持力 一级结构 多肽链中AA的排列顺序 肽 键 二级结构 多肽链折叠或盘曲所形成的空间结构 氢 键 三级结构 在二级结构的基础上进一步盘曲 离子键 四级结构 几条多肽链通过聚合而形成的更高级结构 疏水键 复习思考题 名词解释： 肽鍵 蛋白质的一级结构 兼性离子 等电点 蛋白质的变性作用 简答题： 1、蛋白质变性作用的本质是什么？变性后蛋白质的理化性质有哪些改变？ 2、常用的蛋白质分离纯化方法及原理 填空题 1、蛋白质样品含氮0.2%，则蛋白质含量为 。 2、一个开链五肽中含有 个肽键。 3、蛋白质的PI=5.2，在PH=8.6溶液中状态为 。 4、蛋白质所形成胶体颗粒，在下列哪种条件下最不稳定 。 PHPI PHPI PH=PI PH=7.4 PH=7.0 尚辅网 蛋白质 ‘+’ “-” 两性电解质 正负电荷相等时 溶液的PH值 PI 蛋白质离子 兼性离子 尚辅网 pH=pI +OH- pHpI +H+ +OH- +H+ pHpI 带电荷为零 带电荷为正 带电荷为负 完全质子化 完全去质子化 兼性离子 二、氨基酸的两性解离及等电点 (pK′1) (pK′2) 不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在！ 尚辅网 PH=PI时，Pr电中性； PHPI时，Pr带“-”； PHPI时，Pr带“+” 尚辅网 思考： 人体蛋白质大多数带什么电？ 电泳时放哪一极？ 尚辅网 问题：有两蛋白质混合液，PI1=6.3 ， PI2=4.9 现欲分离两蛋白质，可否运