色谱分析方法的建立.docVIP

色谱分析方法的建立 第一部分 色谱法系统的选择与应用 第二部分 气相色谱法的建立 第三部分 液相色谱法的建立 第一部分 色谱法系统的选择与应用 第一章 气相色谱法的特点 第二章 高效液相色谱法的特点 第三章 气相色谱和液相色谱的比较 第四章 分析条件的确定 第五章 样品的制备 第六章 定量 第七章 仪器选购的原则 第二部分 气相色谱法的建立 第一章 前言 第二章 色谱分离条件选择的指标 第三章 初始操作条件的确定 第四章 填充柱的选择要点 第五章 毛细管柱的选择 第六章 检测器操作条件的选择 第七章 程序升温操作条件的选择 第三部分 液相色谱法的建立 第一章 结论 第二章 分离的基础 第三章 检测灵敏度与选择性 第四章 色谱柱 第五章 反相HPLC 第六章 梯度洗脱 第七章 常规样品反相分离的系统方法 第一部分 色谱法系统的选择与应用 第一章 气相色谱法的特点 1，色谱柱内现象单纯，可以从理论上理解。 2，若用非极性柱，组分按沸点顺序流出。因此，在分配气相色谱法中，若已知化合物，则可预测流出顺序。 3，能较容易地制备具有高分离能力的色谱柱，并可在较长时间内保持稳定的性能。 4，因为移动相是气体，其粘度小，所以增加色谱柱长度可改善分离能力。 5，样品组分在固定相和移动相中易扩散，能迅速达到分配平衡，故可提高移动相的流速以缩短分析时间。 6，检测惰性气体中的样品组分时，可以使用各种高灵敏检测器，所以能做极微量分析和特定组分的高灵敏度的选择性检测。 7，使用通用型检测器时，可以预测注入样品在多大程度上能作为色谱峰流出并被检测，所以分析的可信度高。在不要求精度时，也可以把峰面积百分数近似作为组成百分数，进行快速定量分析。 8，容易与质谱仪或付里叶变换红外光谱仪联用，便于多组分混合物的分离和鉴定。 9，适于分析的物质仅限于在某种形式下为热稳定的挥发性物质。所以从全部化合物来看，适用范围较窄，约为20%。 10，用选择性检测器做微量分析时，样品必须经过前处理以除去干扰组分。 第二章 高效液相色谱法的特点 1，适用样品范围广，80%的分析对象可借此法分析。 2，为进行分离，可以根据样品的组分将流动相和固定相的组合最佳化。如果熟悉液相色谱，这是非常有利的，但对初学者来说，这是困难的。 3，可以使用高效的分离柱，易于分离复杂的多组分混合物。 4，把被分离的组分溶解在流动相中，可以全部回收之。 5，可以使用多种非破坏性高灵敏度和选择性的检测器，把几种检测器串联起来，根据其对应特性，获取与定性有关的重要信息。 6，只能检测从色谱柱流出的组分。 7，由于没有通用型高灵敏度检测器，所以在分析未知混合物而没有色谱峰的时候，无法确定其原因是分离条件不合适，还是检测器没有响应。 8，采用尺寸排斥色谱法时，从低分子到高分子的样品全部流出，而且流出顺序是从高分子量开始，故可根据保留容量推测分子量，最适于做未知样品的组成分析。 9，测定精度好。因为注入精度比气相色谱好，故可以用绝对工作曲线。 10，虽然示差折光检测器为通用型检测器，但和气相色谱的热导检测器和氢火焰检测器相比，由于化合物之间的响应不同，所以用峰面积百分数求由多种化合物组成的混合物时问题较多。 11，要限制色谱柱的使用条件（温度、压力、流动相等）。而且与气相色谱相比，性能随时间的变化较大。必须定期用标准品在标准条件下检查色谱柱的性能。若按照不同的样品对象，固定使用色谱柱，对色谱柱的寿命是有利的。 12，制作色谱柱需要特殊装置和专门技能。 13，柱外死体积对色谱柱的性能有重大的综合性影响，而且连接方法依仪器制造厂而异。 14，与气相色谱法相比，由于共存物质对分离的影响小，易于制备分析样品。 第三章 气相色谱和液相色谱的比较 1，流动相 2，固定相 3，分析对象 4，检测技术 5，制备分离 1，流动相 GC中用气体作流动相，又叫载气。常用的载气有氦气、氮气和氢气。与HPLC相比，GC流动相的种类少，可选择范围小，载气的主要作用是将样品带入GC系统进行分离，其本身对分离结果的影响很有限。而在HPLC中流动相种类多，且对分离结果的贡献很大。换一个角度看，GC的操作参数优化相对HPLC要简单一些。此外，GC载气的成本要低于HPLC流动相的成本。 2，固定相 因为GC的载气种类相对少，故其分离选择性主要通过不同的固定相来改变，尤其在填充柱GC中，固定相常由载体和涂敷在其表面的固定液组成，这对分离有决定性的影响，所以，导致了种类繁多的GC固定相的开发研究。迄今已有数百种GC固定相可供我们选择使用，但常用的HPLC固定相也就十几种。故HPLC在很大程度上要靠选用不同的流动相来改变分离选择性。不然，毛细管GC常用的固定相也不过十几种。在实际分析中，GC一般是