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生物安全及无菌操作基本技术 沈阳医学院 病原生物学教研室 刘 新 生物安全 biosafety 生物安全 biosafety 避免危险生物因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩散并导致危害的综合措施。 生物实验室 实验室分区 laboratory area 按照生物因污染概率的大小，实验室可以进行合理分区。 危害程度分级：根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级 生物危害程度 Ⅰ级（低个体危害，低群体危害） 不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。 Ⅱ级（中等个体危害，有限群体危害） 能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。 生物危害程度 Ⅲ级 ( 高个体危害，低群体危害) 能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。 Ⅳ级（高个体危害，高群体危害） 能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与 动物之间传播的病原体。 实验室生物安全 实验室及其人员生物安全管理，按国务院令(第424号)《病原微生物实验室生物安全管理条例》于2004年11月起施行。 病原微生物，是指能够使人或者动物致病的微生物。实验活动，是指实验室从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。 生物安全水平分级 生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为4级，以表示实验室的相应生物安全防护水平。 BSL－1：防护水平最低,普通建筑物即可，每个实验室应设洗手池。 BSL-2：实验室的门有可视窗。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。在实验室内使用专门的工作服；应戴乳胶手套。配备高压蒸汽灭菌器，在实验室内配备生物安全柜。 BSL－1实验室 防护水平最低,普通建筑物即可。 生物安全水平分级 BSL—3实验室：自成隔离区（有出入控制）或为独立建筑物。 BSL—4 防护水平最高。实验室应建造在独立的建筑物内或建筑物中独立的完全隔离区域内，该建筑物应远离城区。 生物安全柜 生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是为操作具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。使用生物安全柜可以减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。同时也能保护环境。 无菌操作基本技术 灭菌 接种 * Ⅱ级 Ⅳ级 Ⅲ级 BSL-2 *