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系统发育分析软件Mesquite对植物形态性状在分子系统树上进行了重建,揭示植物主要特征的系统演化规律用MrBayes v.3.1.2软件构建贝叶斯树, 依据Modeltest3.7中最小AIC值产生的最佳核苷酸替换模型为TIM+I+G, 设置核苷酸替代类型数nst=6, 位点间速率分布设置为rates=gamma, 以随机树为起始树, 4条马尔可夫链运行100万代, 每100代抽样并保存数据一次, 舍弃老化样本(2500抽样代)后, 根据剩余样本构建合意树. Mesquite来说,需要舍弃前面贝叶斯计算不稳定的9001棵树,只保留最后计算稳定的1000棵树。这时会用到Ultraedit软件(见群共享),对文件g.nex.run1.t进行编辑只保留最后1000棵树)
操作步骤如下:
主菜单File
—open file(文件类型举例g.nex.run1.t)点ok后出现界面
鼠标点上图Trees from“”,后点view trees
主菜单Characters
—New Empty Matix,根据需要填写Number of characters,后点ok
而后编辑性状名称,以及更改问号(如铁线蕨毛被:叶轴近轴面用RB表示,叶轴远轴面用RA表示,无毛:0;毛少:1;多毛:2,未知的用?)
之后鼠标点击靠左边打开的Tree from“g.nex.run1.t”,出现如下界面
主菜单Analysis:Tree
—Trace characters over trees
点ok后,再点ok,,出现如下界面,选择第二个最大释然法Likelihood Ancestral States(相对更可靠),也可以用第一个最大简约法
在点击第二个stored probability Model
点击Shade states,再点击Stored trees,在如下图中选择Mk1(est.)
出现如下界面
主菜单Display
—Tree Form
—BallsSticks(卫然老师推荐这种树的形状,也可以选择其他的)
主菜单Trace Over Trees
—Show Fraction Of Trees with Equivocal将其勾掉,即不要√
主菜单Trace Over Trees
—Calculate
—Average Frequencies Across Trees
注意:选择第3步中的最大释然法Likelihood Ancestral States不能识别树的拓扑结构,所以需要手动筛选下图中的Tree #,填写数字范围是1—1000(对应背景),以此来筛选最接近你真实的拓扑结构。(若用第3步中的最大简约法则不用考虑拓扑结构问题,但没有最大释然法可靠)
补充:在对铁线蕨属鞭叶系植物研究中(黑色箭头所指的红框是外类群),那么祖先应该是黄色圆圈,即鼠标指向位置,详细信息见绿色框所指内容。
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