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番茄红素提取工艺的优化.doc
番茄红素提取工艺的优化
谢放 李建宏 张楠 张泽
(兰州交通大学化学与生物工程学院 甘肃 兰州 730070)
摘要: 本文对从番茄果实中提取番茄红素的传统工艺进行了改进,设计出了一整套提取检测工艺,并通过实验对新工艺和传统工艺进行了检测对比,结果显示:新工艺不仅能缩短工作时间,提高工作效率,而且能有效地除去样品中脂肪酸等杂质的干扰,使实验结果更准确。
目的、方法、结果
关键词:番茄,茄红素,提取工艺
中图分类号:
番茄红素衡量加工番茄品质的一个很重要的指标,如何快速简便而又准确提取与测定番茄果实中的茄红素含量,一直是人们探索的一个热点[3]。前人研究出的提取茄红素的常用溶剂主要有氯仿,二甲苯,石油醚,乙酸乙酯等有机溶剂 [4],但都有存在提取效率低,费时费力的缺点,目前国标法(GB/T14215—93)以甲苯为提取剂,方法简便,工作效率高,但无法有效除去样品中脂肪酸等杂质的干扰,因而结果不太准确。
针对目前方法的缺点,本实验以氯仿为提取剂,设计出了一套新的提取与测定流程,简化了工艺,大幅提高了工作效率,通过在研磨时提前添加碳酸钠粉末、水洗除杂等方法,有效去除了脂肪酸等杂质的干扰,使检测结果的准确性有了很大的提高。为番茄的品质评价和番茄红素分析测定制定了新的方法。
1 材料与方法
1.1 实验材料
新鲜加工番茄果实,采自甘肃靖远县,果实大小均匀,成熟充分,无病害及腐烂。
1.2 仪器与试剂
实验仪器:UV759型紫外可见分光光度计(上海精科),TGL-20M高速离心机(长沙平凡仪器厂),榨汁机,恒温水浴锅,电子天平,分析天平,研钵,25ml棕色容量瓶,分液漏斗,铁架台,10ml离心管,移液器
实验试剂:氯仿,甲醇,无水碳酸钠,石英砂,蒸馏水
1.3 工艺流程
1.3.1取样 挑选待测番茄果实样品洗净,去皮去籽,放入榨汁机中将果肉充分打碎成酱,在天平上称量各2g。
1.3.2 研磨 将称好的果酱放入研钵中,加入1.0克石英砂充分研磨,再加入1.5克无水碳酸钠粉末继续研磨约一分钟。将粉末小心移入10ml离心管中。
1.3.3 甲醇洗涤 在研钵中分两次加入甲醇2ml将其中剩余残渣洗涤后倒入离心管。将甲醇加到距管口1cm,盖紧盖子后将甲醇和粉末充分混合,以8000转∕分钟的转速离心2分钟,将上清液倒入回收瓶,再重复洗涤一次。
1.3.4 氯仿浸提 在离心管中加入约6ml氯仿,玻璃棒搅起沉淀,盖紧盖子,用力摇动离心管,使粉末和氯仿充分混合。在45℃的水浴锅中加热3min。在8000转∕分钟离心2min,将上清液氯仿倒入25ml棕色容量瓶中,再重复浸提两次后定容至25ml。
1.3.5 洗涤 (蒸馏水) 在分液漏斗中加入约30ml蒸馏水,盖紧盖子上下颠倒几次,使两种液体充分混合接触,静置3min,使液面分开。将提取液漏入25ml的棕色容量瓶中。重复上述步骤1次。将提取液漏入25ml棕色容量瓶中。
1.3.6 比色测量 用移液器从容量瓶中吸取0.4ml提取液,放入比色皿中,用另一个移液器吸取氯仿3.6ml放入比色皿中稀释。在485nm波长下测定吸光值,准确记录。
2 结果分析
2.1 石英砂用量的确定
等量称取果浆并置于准备好的7个研钵中,分别加入3.5g(对照)、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.5g石英砂进行研磨,按1.3方法提取茄红素,用移液器从容量瓶中吸取0.2ml提取液放入比色皿中,再加入1.8ml氯仿进行稀释。以氯仿作为对照,在485nm波长下测定吸光值。
结果如下: (要有表头!如:表1 不同石英砂添加量所得测定结果)
组号 对照 1号 2号 3号 4号 5号 6号 石英砂/g 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 吸光值 0.3372 0.3361 0.3372 0.3299 0.3231 0.3341 研磨困难,离心效果不佳 0.3321 0.3401 0.3199 0.3345 0.3459 0.3327 0.3291 0.3332 0.3442 0.3319 0.3333 0.3300 平均值 0.3328 0.3365 0.3338 0.3321 0.3341 0.3323 / 由以上数据可得出:在研磨充分的情况下,石英砂的用量不影响实验结果,但量太少,研磨困难,故石英砂用量以1克为最适。
2.2 石英砂与碳酸钠比例的确定
等量称取果肉并置于准备好的7个加入1.0g石英砂研钵中,分别加入3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、1.0g、0.5g、0g(对照)碳酸钠进行研磨,按1.4方法于485nm波长下测定吸光值。
在石英砂用量为1克的情况下,在研磨时加入不同量的碳酸钠粉末,
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