酶的基本性质.pptVIP

实验三 酶的基本性质 了解温度对唾液淀粉酶活性的影响，进一步明确最适温度的概念。 了解pH值对唾液淀粉酶活性的影响，学习测定最适pH值的方法。 了解酶促反应的激活和抑制，学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。 酶的催化作用受温度的影响很大。 提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高10℃，反应速度加快一倍左右，最后反应速度达到最大值。 酶是一种蛋白质，当温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后，随着温度升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。 反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。高于或低于最适温度时，反应速度逐渐降低。 酶的活性受环境pH的影响极为显著。 通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值，称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。 不同酶的最适pH值不同，例如，胃蛋白酶的最适pH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适pH为8等。 酶的活性常受某些物质的影响。 有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂； 有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。 例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为其抑制剂。 很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且常具有特异性。 激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。 例如，氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。 【仪器和试剂】 实验仪器 1.移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘 实验材料和试剂 1.pH7.0的磷酸缓冲液、唾液淀粉酶液、1%淀粉溶液（含0.3%NaCl）、碘液。 2. pH7.0/8.0/5.0的磷酸缓冲液、唾液淀粉酶液、1%淀粉溶液（含0.3%NaCl）、碘液 3. 1%NaCl，1%CuSO4，蒸馏水、唾液淀粉酶液、 0.1%淀粉溶液、碘液 【实验方法与步骤】 1、温度对酶活性的影响 【实验方法与步骤】 2、pH值对酶活性的影响 【实验方法与步骤】 3、酶的激活和抑制 【实验结果与分析】 【讨论与心得】 * * 【实验目的】 【实验原理】— 温度对酶活性的影响 某种酶的最适温度 【实验原理】— pH值对酶活性的影响 【实验原理】— 酶的激活和抑制 【实验原理】 本实验分别在不同温度、不同pH值及不同物质作用的条件下使淀粉酶作用于其底物——淀粉，并用碘液检查酶促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。 淀粉 糊精 麦芽糖 淀粉酶 淀粉酶 大 小 中 碘液 碘液 碘液 碘液 碘液 蓝色 蓝紫色 暗褐色 红色 碘色 5，摇匀 5，摇匀 5，摇匀 碘液（滴） 流动水冷却 冷却3min 100℃ 37℃ 0℃ 反应10min 1 1 1 1%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL） 2 2 2 pH7.0缓冲液（mL） 100℃ 37℃ 0℃ 酶液处理5min 1 1 1 唾液淀粉酶液（mL） 3 2 1 管号 操作项目 保温2min后，从2号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度，若显黄色，则在1,2,3号试管滴加碘液 检查淀粉水解程度 3，摇匀 3，摇匀 3，摇匀 碘液（滴） 将各管混匀37 ℃水浴中保温 保温 1 1 1 淀粉酶液（mL） 1 1 1 1%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL） 3 / / pH8.0缓冲液（mL） / 3 / pH7.0缓冲液（mL） / / 3 pH5.0缓冲液（mL） 3 2 1 管号 操作项目 保温30s后，从1号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度，若显黄色，则在1,2,3号试管滴加碘液 检查淀粉水解程度 2 2 2 碘液（滴） 将各管混匀37 ℃水浴中保温 保温 3 3 3 0.1%淀粉液（mL） 1 1 1 淀粉酶液（mL） 1 / / 蒸馏水（mL） / 1 / 1%CuSO4（mL） / / 1 1%NaCl（mL） 3 2 1 管号 操作项目 3.酶的激活和抑制 描述各试管中的现象，解释其原因。 1.温度对酶活性的影响 描述各试管中的现象，解释其原因。 2.pH值对酶活性的影响 描述各试管中的现象，解释其原因。 * * *