免疫接种和抗血清的制备.pptVIP

免疫接种和抗血清的制备 1、目的和要求 通过本次实验，可以了解免疫接种和抗血清制备的常用方法。 2、实验原理和方法 （1）免疫接种：某种疫苗或抗原制剂以适宜方法和途径进入动物体内，刺激机体产生免疫力。常用接种方法有：口服（拌料或饮水）、气雾免疫、刺种、皮下注射、肌肉注射、滴鼻、点眼等。每种疫苗都有其适宜的接种方法。不采用适宜的接种方法可能导致免疫失败。 （2）抗血清的制备：给某个动物免疫接种某一种疫苗或抗原制剂，该动物会被诱导及发生免疫反应，可能会形成一些浆细胞，由浆细胞合成和分泌一定水平的抗体（针对于疫苗或抗原制剂中某些抗原表位的抗体）。采集该动物的血液，分离血清，用适宜的血清学试验分析血清中的抗体水平。如果其抗体含量较高，该血清就是相应疫苗或抗原制剂的抗血清。 3、实验器材和材料 注射器 （1mL、 20mL）、实验动物（大鸡）、疫苗（新城疫Ⅳ系弱毒疫苗），灭菌生理盐水、平皿、灭菌小玻璃瓶或10mL塑料管（带盖子）、鸡笼和饲料等。 4、操作方法 （1）稀释疫苗：按照新城疫Ⅳ系弱毒疫苗的标定接种只数、接种量及实际接种剂量，以灭菌生理盐水进行稀释。若标定接种只数是500，每只接种量（即肌肉注射量）0.1mL，实际接种剂量为标定接种剂量的5倍，则每支应稀释到10mL（500/5x0.1）。 （2）接种方法，采用肌肉注射，选择鸡的肌肉丰富的胸部或腿部，斜着、轻快进针，进针深度一般为1-2cm；缓慢推注液体，稍停留后取出针头。 （3）接种疫苗或抗原后10-20天，皮下静脉采集少量血液，分离血清，以适宜的免疫学检测方法分析血液中相应抗体的水平。若其抗体水平达到要求，就可以从鸡心脏采集多量血液；若其抗体水平达不到要求，可以间隔适当时间再进行一次或多次免疫接种。 （4）鸡的心脏采血：在鸡的第2-3肋骨间、偏下方，以20mL注射器垂直进针，大约3cm。若刺入心脏，会有动脉或静脉血快速流入针管内。缓慢抽动针管，待满时，快速拔出针管，快速注入干净的平皿内，静置，待血清析出。将血清吸出，转移到小玻璃瓶（带塞子）；若有血球，可以转移到离心管，离心后，取上清液，转入小玻璃瓶。以适宜的免疫学检测方法对每只鸡的血清抗体水平和特异性进行鉴定。 在-15至-20℃保存。 * * *