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脊髓损伤后骨代谢形态改变的髂骨形态计量学研究_医学论文 脊髓损伤后骨代谢形态改变的髂骨形态计量学研究_医学论文 作者：李全义，刘时璋，罗振群，弓立群，王茁，马战胜，徐洪海，凌鸣 【摘要】目的：观察和分析脊髓损伤引起骨质疏松患者骨组织形态计量学（骨结构与骨转换）参数特征，进一步探明发生骨质疏松的机制.方法：选择脊髓损伤截瘫患者30（男19，女11）例；颈脊髓伤16例，胸脊髓损伤14例.伤后24h内取髂骨标本设为对照组，伤后1，6，12mo取髂骨标本设为实验组.每位患者均采用自制微创活检器于同一部位获取2cm长的髂骨组织，进行骨组织形态计量学观察与分析.结果：实验组患者髂骨结构参数中骨小梁密度（Tb.N）,骨小梁厚度（Tb.Th）,结点末端比（NTR）均低于对照组（0.05），而骨小梁间距（Tb.Sp）则高于对照组（0.05）；骨转换参数中平均类骨质宽度（Os.Th）,类骨质体积（OV/BV）,平均骨壁厚度（W.Th）均较对照组低，其中两组间比较骨壁厚度（W.Th）差异有统计学意义（0.05）；骨吸收表面（ES/BS）则高于对照组.结论：脊髓损伤后患者由于神经功能缺失和废用因素，引起骨转换出现特异性改变，呈高转换率状态，骨形成与骨吸收严重失衡，导致髂骨代谢显微结构发生明显退变，骨组织力学性能下降，是发生骨质疏松的重要因素. 【关键词】脊髓损伤；骨和骨组织/代谢；骨组织形态计量学 　　0引言 　　脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后，大鼠骨代谢发生改变，骨吸收明显增强，损伤平面以下骨密度（BMD）降低，叶超群等［1］研究认为，脊髓损伤后6mo，骨量骨结构和生物力学性能均已发生疏松改变，原因是破骨吸收增强所致.为探讨脊髓损伤截瘫患者损伤平面以下骨代谢改变的特点，我们选择脊髓损伤截瘫患者30例，通过1，6，12mo不同时期的髂骨形态计量学研究与分析，了解脊髓损伤继发骨质疏松在骨显微结构改变上的特点，探讨骨质疏松发生的机制和特征. 　　1对象和方法 　　1.1对象选择 　　2000／2006收治的脊髓损伤截瘫患者30例，年龄36～71（平均60.5）岁.伤后24h内取髂骨标本，能真实反映脊髓损伤前骨代谢状态，设为对照组B；选择此实验组患者伤后1，6，12mo不同时期取髂骨标本，设为实验组A，其中男19例，为实验A1组，女11例为实验A2组，本组均为脊髓损伤引起截瘫，其中颈椎截瘫16例，胸椎损伤14例.伤后6～12mo，有17例截瘫未恢复，13例有不同程度恢复.根据术前检查血清钙、磷，影像学资料和骨密度测定，确诊损伤当时有骨质疏松者9例，为实验A3组；无骨质疏松者21例，为实验A4组. 　　1.2方法 　　1.2.1标本的采集与制备采用自制微创活检器于髂前上棘后方2～2.5cm处获取2cm长的髂骨组织，生理盐水反复冲洗后，立即置入Millonigs中固定24h，流水冲洗过夜，乙醇逐级脱水，二甲苯透明，甲基丙烯酸甲酯包埋，包埋块经修整后用Leica硬组织切片机制备5μm厚的不脱钙切片，置于已上胶的载玻片上，48℃烘箱中过夜，置入37℃乙二醇乙醚乙酸酯中50min，乙醇逐级水化，甲苯氨蓝染色10min，枸橼酸缓冲液（pH=3.7）冲洗2次，正丁醇脱水，甲苯透明，中性树脂封片. 　　1.2.2骨组织形态计量学观察与分析每一标本取2张切片置于计算机图像分析系统下进行观察与分析.在放大率为4倍的OlympusBH型显微镜下，以相同的间隔移动切片，所有的显微视野均经数码照相机（科达DCS420型）输入自动图像处理系统，以Freepius软件获取和存储图像，以Freemax3.0进行图像分析.每一图像中均划定兴趣区（Regionofinterest,ROI）,ROI中应除外有明显骨组织碎裂的区域，所有测量均在ROI中进行,测定以下参数用于骨组织形态计量学分析.ROI面积：实际上为ROI内骨小梁和髓腔面积之和.Tb.Ar：为ROI内所有的骨小梁面积之和.皮质骨宽度（Ct.WI）：沿皮质骨的内侧和外侧缘分别以Trace命令描记，然后以Thick命令得出内外缘间的平均距离，即为皮质骨宽度.总骨小梁表面长度（Tb.Pm）：为该视野中所有的骨小梁边缘的长度之和.结点数（Tb.n）：结点为3条或4条骨小梁交汇处.骨小梁游离末端数（FET）：游离末端为与其他任何骨小梁不连接的骨小梁末端.类骨质长度：甲苯氨蓝染色的切片上，类骨质位于骨小梁表面的成骨细胞层和矿化骨之间，呈浅蓝色，矿化骨呈深蓝色.类骨质宽度（Os.Th）：沿类骨质层的上下缘，以Trace命令画出两条线，以Thick命令测定两线之间的平均距离，即为类骨质宽度.Os.Ar：类骨质面积；吸收表面长度：吸收表面为骨小梁上可观察到破骨细胞，或虽然看不到破骨细胞，但表面已经形成程度不