色谱法分离原理论.ppt

第8章 色谱法分离原理论 §8.1 概述 §8.2 线性洗脱色谱及有关术语 §8.3 色谱法基本原理 §8.4 分离度 §8.5 色谱定性和定量分析 §8.1 概述 化学分析方法的基本要求是其选择性要高。即，在分析过程 中，待测物与潜在的干扰物的分离是最为重要的步骤！ 20 世纪中期，大量采用一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和 萃取。 现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色谱 方法是最为有效的分离手段！其应用涉及每个科学领域。 1903年，俄国植物学家MikhailTswett 最先发明。他采用填充 有固体CaCO3细粒子的玻璃柱，将植物色素的混合物(叶绿素和叶 黄素chlorophylls xanthophylls)加于柱顶端，然后以溶剂淋 洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱(希腊 语中“chroma”=color; “graphein”=write) 。 20世纪50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展， 复杂组分分析发展的要求）。 色谱法的发展历史 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 色谱分离基本原理： 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。处于柱起始端的样品中各组份与两相进行不同程度的作用。与固定相作用强的组份随流动相流出的速度慢，而与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差异，使得混合组份最终形成各个组份的“带(band)”或“区(zone)”，对依次流出的各个组份物质可分别进行定性、定量分析。 色谱分类方法 按照分离过程中相系统的形式和特征，可分为： 柱色谱法 填充柱色谱法 毛细管色谱法 平板色谱法 纸色谱法 薄层色谱法 按流动相，可分为： 气相色谱法 液相色谱法 超临界色谱法 按固定相物态，气相色谱法可分为： 气固色谱法 气液色谱法 按流动相物态，液相色谱法可分为： 液固色谱法 液液色谱法 按色谱动力学过 程，可分为： 洗脱色谱 顶替色谱 迎头色谱 按组份在固定相上的物理化学原理，分为： 吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换 剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱:（尺寸排阻色谱）：不同尺寸分子在固 定相上的渗透作用； 色谱法的特点 §8.2 线性洗脱色谱及有关术语 分配系数K 二 、基线 在实验条件下，色谱柱中仅有纯流动相通过时，检测器响应信号的纪录值称为基线。稳定的基线应为一水平直线。 三、峰高：色谱峰顶点与基线的距离，以h表示。 四、保留值(Retention value, R) (1)死时间(Dead time, tM)：不被固定相吸附或溶解进入色谱柱时，从进样到色谱图上出现峰极大值所需的时间。它与色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不与固定相作用，因此，其流速与流动相的流速相近。据tM可求出流动相平均流速。 (2)保留时间tR：试样从进样开始到柱后出现峰极大值时 所经历的时间，称为保留时间。它包括 组分随流动相通过柱子的时间和组分在 固定相中滞留的时间。 (3)调整保留时间：某组分的保留时间扣除死时间后 的称为该组分的调整保留时间(单位 为s或cm)，它是组分在固定相中的 滞留时间。即由于时间为色谱定性 依据。但同一组分的保留时间与流速 有关，因此有时需用保留体积来表示 保留值。 (4) 相对保留值 ：某组份2的调整保留值与组份1的调整保留值之比，称为相对保留值。 注意： 只与柱温和固定相性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动相流速无关，因此，它是色谱法特别是气相色谱法中广泛使用的定性参数。 色谱流出曲线的意义： 色谱峰个数=样品中单组份的最少个数； 色谱峰保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； 色谱两峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。 色谱理论应说明的问题