间接免疫酶组织化学检测猪繁殖和呼吸道综合症病毒在人工感染仔猪体内的分布规律的研究.pdfVIP

猪传染病 仍然能检测到PGa妒ol，在本实验中，基因枪组和肌肉注射组最强阳性杂交信号出现在免疫后3h，都在较 短时间内到达各主要组织器官，本实验中基因枪轰击免疫同肌肉注射免疫相比，基因枪轰击法疫苗用量较 小，但是免疫效果．{F常理想，原因是与基囚枪轰击免疫的免疫途径有关，它利用高压氮气将包裹金属颗粒 的核酸疫苗直接打入细胞中，与肌肉注射法相比，核酸疫苗没有被机体内环境核酸酶降解的过程，减少了 核酸疫苗的损失，从皮肤组织的结构特点看，基因枪轰击法抗原提呈效率较高【6’7】皮肤细胞具备了很多有 利予诱导免疫反应的特点。首先，皮肤细胞附近有很多丰富的树突状细胞和巨噬细胞，可有效完成抗原提 呈，并激发免疫应答。其次，皮肤朗氏细胞可将抗原，从皮肤运输到附近淋巴细胞的功能，有利于免疫应 答的迅速产生。第三，皮肤组织细胞中含有丰富的表达MHC分子的TH细胞，可产生多种细胞因子并诱导免 疫系统的激活。皮肤组织的这些特征解释了为什么基因枪轰击法基因疫苗剂量较小，却能够有效激发机体 的免疫应答反应而取得良好的免疫效果。与皮肤细胞相比，肌细胞只能表达低水平的MHCII类细胞，因此 抗原提呈能力远不如皮肤细胞。 广泛分布，且存留较长时间，从侧面解释了基因枪轰击法是一种良好的免疫接种方法。然而由于基因枪轰 击可能改变诱发免疫反应的类型，同时DNA疫苗包被的金属颗粒的制备较为复杂，而且还需要特殊设备， 因此在实际生产中要将基因枪用于基囚疫苗的免疫实践仍然有很长的路要走。 参考文献略 间接免疫酶组织化学检测猪繁殖与呼吸道综合症病毒 在人工感染仔猪体内的分布规律的研究 张平英1．2,3，程安春1一，汪铭书1,2刘伍梅2，李雪梅2，陈希文2，刘菲‘，周毅’，陈孝跃1,2 (1．动物疫病与人类健康四川省重点实验室，四川雅安625014；2．四川农业大学动物科技学院禽 病防治研究中心，四川 雅安625014；长江大学动物科学学院434023) 了检测猪繁殖与呼吸道综合症病毒抗原的间接免疫酶组织化学法。该方法只与PRRSV感染猪组织呈现阳性 反应，与猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙脑病毒人工感染并致死仔猪的肝脏组织呈现阴性反 应。用该方法检测PRRSV SC．1株人工感染28日龄仔猪，感染斤3天即可在肺门淋巴结检测到PRRSV抗原； 感染初期在肺门淋巴结、肺脏、胸腺、扁桃体检测到PRRSv抗原：人工感染中期，在脾脏、肝脏、肾脏、 肠、肺脏、胸腺、扁桃体以及淋巴结多数组织检测到抗原；感染后期，除肺门淋巴结检测剑抗原外，其余 。 组织都为阴性。 ‘ 关键词：猪繁殖与猪繁殖与呼吸道综合征病毒，问接免疫组化，分布规律 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine and reproductiverespiratory 的严重危害养猪业的一种新的病毒性传染病，其病原为猪繁殖与呼吸综合征(Porcine and reproductive respiratory 殖障碍，引发新生仔猪的高致死率及生长猪的呼吸道症状。该病目前在我国广泛流行，给我国养猪业带来 试验(ELISA)和RT-PCR、原位杂交等I1-410这些方法在用T-PRRSV的诊断与检测时有其各自的优点， 248 ． 第六次全国会员代表大会暨第l1次学术研讨会 但却不能用于PRRSV感染的组织器官和细胞的抗原定位检测和直观判断。由于免疫酶组织化学法 (ImmunoDeroxidaSe Staining，IS)具有特异、直观和敏感的特点，通过普通光学显微镜即可判定结果，在 人类肿瘤等检测中得到广泛使用，但应用于动物医学研究中的报道相对较少15】。本研究旨在建立检测 验检测手段。 I材料和方法 I．I材料 ． I．I．I毒株：PRRSV四川分离株(PRRSVSCI株)。由动物疫病与人类健康四川省重点实验室分离、鉴定、 保存【61。 物室提供。 1．1．3抗体及试剂：兔抗PRRSV