人参毛状根生物合成熊果苷的研究.pdfVIP

第26巷第12期 中国中药杂志 Vol26．No12 2001年12月 China of(?aineseMateria Dec．2001 Jm-nal Medica 人参毛状根生物合成熊果苷的研究 赵明强，丁家宜，刘 峻，胡 波 (中国药科大学生物技术研究室，江苏南京21003$) [摘要] 目的：研究人参毛状根生物合成熊果苷的基本条件。方法：以熊果苷的含量、氢醌(1，4-对苯二酚)的 转化率为指标．找出适于生物台成的培养条件l持续时间和底物浓度。结果：培养22d的人参毛状根更换含底物的 ％培养基后，对浓度为2mmol·L一的氢醌持续转化24h，所台成的熊果苷占干重的13，O％，转化率达890％。结 论：本文首次以人参毛状根为反应器，人工合成出人参属植物所不具有的熊果苷。 [关键词]人参毛状根；氢醌；生物合成；生物转化；糖基化：熊果苷 5675+1 04 [中图分类号]S [文献标识码]B[文章编号]100l-5302(2001)12．0819 人参Pa,2ax 人参毛状根，吸干表面水分，称湿重(FW)。每次取 gi,2se,29C．A．Meyer是传统的名贵 中药，由于人参栽培中存在栽培困难、周期过长、地 样lO瓶，共重复3次。 域限制等难题，人参的组织培养受到广泛重视。我 1．5 熊果苷含量分析方法 室建立起人参细胞大量培养实现工业化生产天然药 1．5．1 仪器与试剂 日本岛津LC一10AT高效液 物…。因毛状根培养体系具有生长速度快，有用物 柑色谱仪，日本岛津10SPT一10AUV．VIS检测器， 质含量高和遗传性状稳定等特点，大有取代细胞培 HW色谱工作站，乙腈为色谱纯，水为2次重蒸水， 养之势一2。继人参细胞大量培养后，我窀又建立起 熊果苷标准品(SIGMA公司)。 人参毛状根培养体系_3 J。近lO年，国内外学界一致 1．5．2 Shim—Pack 色谱条件 色谱柱C18 CLC． 认为熊果苷是抑制酪氨酸酶活性的优良天然产 ODS(1．6nlm×150 mm，5”m)；流动相．乙腈．水(1： 物-4J。我室已将人参细胞与熊果苷配伍在化妆品中 9)；流速1ml-mino；检测波长28011,21；进样量20 应用，深受广大消费者青睐-5J。天然熊果苷来自熊 ；tl；柱温25℃。 果、越橘等植物【6-…，未曾见存在于人参属植物中的 1．5．3对照品和供试品溶液的制备 报道。本文首次利用人参毛状根将外源氢醌转化为 标准品溶液取熊果苷标准品5．44 mg，用流 熊果苷，已获得初步结果，现报告如下。 动相定容于5ml的容量瓶，制成浓度为1．088 mg· 1 材料和方法 ml。1的标准品溶液。 1．1 实验材料人参毛状根E4