固定相优化液相色谱法对候选新药雷公藤衍生物进行有关物质检查.pdfVIP

第39卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第8期 2011年8月 ChineseJournalof 1266～1269 AnalyticalChemistry 固定相优化液相色谱法对 候选新药雷公藤衍生物进行有关物质检查 陆静 象丽丽 季畋 陈东英。 (中国科学院上海药物研究所，上海201203) 摘要采用同定相优化液相色谱法(POPLC)建立了候选新药雷公藤衍生物(T8)中有关物质的检查方法。 分别采用5种不同类型的固定相色谱短柱对含有T8和有关物质的混合溶液进行实验，流动相为乙腈一水 (35：65，WV)，流速为0．5mlJmin，柱温为30℃，检测波长为219am，获得相应各柱死时间、各组分保留时间和理 论板数。经专门软件进行计算拟合，得到优化的色谱柱组合为20Film氰基柱+80mm氨基键合柱。结果表明， 在上述优化色谱条件下，10mill内可实现T8与有关物质之间的良好分离，并可用于考察T8的强制性破坏溶液。 关键词 固定相优化；液相色谱；药物；有关物质；雷公藤衍生物 1 引 言 组合实现液相色谱条件优化的技术【l。】。由于不同类型的固定相色谱柱对于待分离组分具有不同的保 留机理，因此为液相色谱条件的优化提供了正交选择性，从而提高了液相色谱条件优化的有效性。目前 POPLC的应用报道尚有限，主要涉及对7种黄酮类化合物的分离、12种杀虫剂成分的分离刚，对混合甾 体化合物的分离删、爆炸物的分离研究嘲，甲状腺激素中的杂质分析”1以及13种寡肽混合物的分离【81。 (5R)一5一羟基雷公藤内酯醇(T8)是雷公藤甲素5一位羟基化的结构修饰产物，具有抗炎、免疫抑制的 活性。作为治疗类风湿性关节炎的候选新药，目前正在临床试验阶段。为了保证T8临床疗效的安全有 效性，开展T8中有关物质的检查是一项重要研究内容。有关物质来源于合成原料、反应中间体、副产物 以及药物在货架存放期间可能出现的降解产物。有关物质不具有治疗作用，反而可能影响药物的疗效， 甚至可能具有安全隐患，如毒副作用、致癌性或致畸性。在T8中可能涉及到的已知有关物质化学结构 如图1所示，其中Impl和T8为一对差向异构体，极性差别较小，这两者间的分离将是考验色谱分离能 力的关键指标。本研究采用POPLC法对T8中可能存在的有关物质建立快速“普查”式的色谱分离，并 初步评价POPLC技术在开发有关物质检查的方法学特点。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 DionexUltiMate 色谱工作站(德国Dionex公司)；纯水机为Mill—Qintegral3(美国Millipore公司)。 均由本所合成。实验用水经纯水机纯化。 POPLC色谱柱套装包含ProntoSIL C18柱(C18柱)，ProntoSILC30柱， Phenyl柱(Ph柱)，ProntoSIL ProntoSIL mm(3mmi．d× EPS柱(EPS柱)和ProntoSILCN柱(CN柱)，长度分别为20，40，60和80 2010-12—16收稿；2011-04-28接受 (No．GZ364)资助 ’E-mail：dychcn@mail．shcnc．ac．ell 万方数据 第8期 陆静等：固定相优化液相色谱法对候选新药雷公藤衍生物进行有关物质检查 5rtm)及优化软件(德国BischoffChromatography公司)。 O O O O O Imp4 5 Imp Imp6 图1 T8及