土壤中多环芳烃化合物的生物降解及监测.pdfVIP

I量绣尉掣与匙求第29卷第4期2006年4月 土壤中多环芳烃化合物的生物降解及监测 ‘张小凡1．小柳津广志2 1 2．日本东京大学农学生命科学研究科，东京 13—8657) (1．上海交通大学环境科学与工程学院，上海200240； 摘要：在实验室模拟条件下，研究芳香化合物菲污染土壤中的生物降解作用。结果表明，转基因工程菌对土壤中菲的生物降解有 很好促进效果，在30d内约有50％的菲被降解。同时利用分子生物学技术对污染环境中转基因工程菌进行了追踪监测，发现添加菌的数 量随时问的推移逐渐减少。 关键词：土壤；菲；生物修复；生物监测 中图分类号：X830．2文献标识码：A 文章编号：1003—6504(2006)04—0042-03 ” 多环芳烃是一类含有二个苯环以上的有机化学 DNA 污染物，主要来源于人类生产活动和能源利用过程， 用苄基氯法罔；DNA纯化用FastSPIN试剂盒 如石油、煤、木材等燃烧过程，以及石油及石油化工产 (Bio sp． 品生产过程。由于多环芳烃的潜在毒性、致癌性及致 突变作用，将严重影响到人类健康，因此，多环芳烃在 摸板制作而成网。PCR扩增仪为LightCyclerTMSystem 环境中的能否被微生物快速地降解引起了人们的重 (Roche 视㈣。本研究在实验室模拟条件下，使用转基因工程 LC_DNAmasterSYBR green 25mmol／L 菌，对芳香化合物菲污染土壤的生物修复进行了探 Mannheim)，50mmol／L KCl，12p。L MgCl2j 7 37和5’ 讨。同时，作为评价生物修复效果的一个重要指标，本 2¨L弓f物丰(5 研究采用分子生物学技术追踪监测了转基因工程菌 唧cGAATTGcGGAc3 在污染环境中的动态，其最终目的是为多环芳烃等有 毒化合物的生物修复及评价方法提供科学依据，使生 每个循环在55℃5s。 物修复技术更加规范化、标准化。 ‘(2)标准曲线的制作。将LB培养基培养的大肠杆 1材料和方法 再从土壤中提取DNA，利用上述引物进行PCR扩增， 1．1微生物及培养 并以PCR扩增产物荧光强度的对数为纵坐标，PCR 实验使用菌株为带有芳香化合物菲降解基因片 循环数为横坐标制作出标准曲线。 段的大肠杆菌JMl09一py3t3】，微生物培养使用LB固 体培养基，培养温度为30℃，摇床转速为200r／min。 产物的荧光强度，最后根据标准曲线算出添加菌的 ’ 1．2生物修复模拟实验 残存量。 将6009土壤加入到lL的玻璃瓶中，同时混入