基于萤火虫荧光素酶ATP生物发光法灵敏度的研究进展.pdfVIP

of 安徽农业科学，JournalAnhui A和．Sci．2013，41(24)：9879—9881，9901 责任编辑刘月娟责任校对卢瑶 基于萤火虫荧光素酶ATP生物发光法灵敏度的研究进展 常超，王琨，王凌，伍金娥 (武汉轻工大学食品科学与工程学院，湖北武汉430023) 摘要在工业化制造过程中，对微生物总数的监测至关重要，尤其是在食品、药品、电子和化妆品等产业。基于萤火虫荧光素酶的A1P 生物发光法是一种快速、简便的方法。尽管在上述领域中有部分认可，但由于该法存在对环境的敏感性、微生物的检测限偏高、缺乏检 测结果RLU的标准等局限性，限制其更为广泛的应用。该研究综合分析了该方法的原理、检测步骤、存在的问题，讨论了通过ATP提取 方法、提高荧光素酶活性稳定性、引入扩增体系的研究作为提高方法的灵敏度的切入点，并综述了国内外在此方面的研究进展，为研制 更稳定、更精确的生物发光方法提供思路。 关键词三磷酸腺苷；萤光素酶生物发光法；检测 中图分类号$509．9文献标识码A 文章编号0517—6611(2013)24—09879—03 Rwh of LuciferaseA’I甲Bi胡uminescence rrogr嘴forSe戚fiv；tyFirefly et CHANGChao offoodscienceand engineering，WuhanPolytechnic 430023) al(College University，Wuhan，Hubei of as All6traetTotalnumberof inthe industrialis inindustriessuch manufacturingcritical，especially food， microorganismsmonitoringprocess of method andcosmetics．A1Pbioluminescencchciferflse-basedisafastand medicine．electronics firefly easy．operatedmethod．Although即一 ofmicrobial inflomeof as tothe detectionlimitations 曲ed these越reas，there黜stillmanylimitations，suchhi【ghsensitivityenvironment，higll lackofdetectionof and were was and criteria RLU．ne曲neipletestingprocedure，limitationproblemsanalyzed．nesensitivityimprovement discussedfrom methodof offluorescein and as extracting A，rP，improvement enzymestabilityintroducing锄plifieationsystembreakthroughs the athomeandabroad