梅花鹿茸中活性多肽的纯化、测序及功能研究.pdfVIP

V01．28 高等学校化学学报 No．10 2007年10月 CHEMICALOFCHINESEUNIVERSITIES 1893．1896 JOURNAL 梅花鹿茸中活性多肽的纯化、测序及功能研究 严铭铭1，曲晓波1，王旭1，刘宁2，刘志强2，赵大庆1，刘淑莹2 (1．长春中医药大学研发中心，长春130117；2．中国科学院长春应用化学研究所，长春130022) 摘要利用凝胶过滤、离子交换层析及C。。反相柱层析等方法，从梅花鹿茸中分离得到了一个多肽CNTl4， SDS．PAGE电泳显示其为一条带，HPLC图谱为单峰，激光解析电离飞行时间质谱测定其分子量为 1479．9028．氨基酸组成分析结果表明，此多肽主要含缬氨酸、亮氨酸、谷氨酸及脯氨酸，用电喷雾串联质谱 增殖．同时，采用固相合成法对该多肽进行了合成，与所分离的天然多肽进行了结构与性质的比较． 关键词鹿茸；多肽；提取纯化；生物活性 中图分类号0629．72 文献标识码A 文章编号0251-0790(2007)10-1893}-04 随着人口老龄化的日趋明显，老年性痴呆病严重影响着人们的生活，目前对老年性痴呆病的防治 已成为世界药物开发研究的热点．鹿茸作为传统的名贵中药材，在我国已有上千年的药用历史，它所 具有的以每天l～2cm速度快速生长的特性，已引起了各国学者的浓厚兴趣．本文结合拟开发梅花鹿 Temminck)中 茸抗衰老多肽制剂这一攻关项目，采用生物化学的分离手段，从梅花鹿茸(C毫n脚n却On 远远小于50％，可确定为源于梅花鹿茸的一个新多肽．生物活性研究结果表明，该多肽可明显促进小 鼠海马神经细胞生长．本文采用固相合成法合成了该多肽，为开发鹿茸中抗衰老药物提供了可能． 1 实验部分 1．1试剂与仪器 鲜梅花鹿茸(Cervus nippon Fast 分子量标准、SephadexG-25、DEAE-Sepharose 唑一1．基一氧基三吡咯烷基磷)购自上海延长生化科技发展有限公司． ．J-25高速冷冻离心机(Beckman公司)；BASELIN Deca LCQ Xpplus)；Q-TOF2正交加速电喷雾串联质谱仪(英国Micmmass公司)． 1．2梅花鹿茸多肽的分离纯化 取新鲜梅花鹿茸，洗净，用胶体磨匀浆，透析，取外透液，冻干，得梅花鹿茸粗提物．进行Sepha- dex Fast G-25凝胶过 G-25凝胶过滤层析no】、DEAE．SepharoseFlow离子交换层析口’4]、再经Sephadex 滤层析、超滤浓缩、反相c。。柱层析：得单一鹿茸多肽CNTl4． 1．3鹿茸多肽理化性质分析 —— ’’·’一、’‘ 收稿日期：2007-01-24． 基金项目：国家科技部十五攻关项目(批准号：2004BAgOTAl7)资助． 万方数据万方数据 高等学校化学学报 acid， moVL HCI于 CCA)为基质，取O．5止样品，进