人参鲨烯环氧酶基因的克隆与序列分析.pdfVIP

吉林农业大学学报 ， （）： ， ： ２０１４ ３６ ２ １４９～１５２ １７０ ｈｔｔｐ ／／ｘｕｅｂａｏ．ｊｌａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ： ＪｏｕｒｎａｌｏｆＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｅｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 人参鲨烯环氧酶基因的克隆与序列分析 侯双利，刘翠晶，杨利民，韩 梅 吉林农业大学中药材学院，长春１３０１１８ 摘 要：以五年生人参根组织为试验材料，提取总ＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ法对人参鲨烯环氧 酶（ ）基因的 进行克隆及序列分析，初步探讨人参皂苷生物合成途径中的影响因子。结果表明：获得 ＳＱＥ ｃＤＮＡ 人参 基因全长片段大小为 ，开放阅读框长 ，编码 个氨基酸残基，与其他植物核苷酸序 ＳＱＥ １６３６ｂｐ １６１１ｂｐ ５３６ 列具有较高同源性，其中与三七、龙牙惚木、刺五加同源性分别为 、 、 。 ９８％ ９６％ ９０％ 关键词：人参皂苷；鲨烯环氧酶基因；克隆；序列分析；生物合成；ＲＴ－ＰＣＲ 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ５６７５１ Ｑ７８５ Ａ １０００５６８４ ２０１４ ０２０１４９０４ ： ＤＯＩ １０．１３３２７／ｊ．ｊｊｌａｕ．２０１４．１７３３ 引文格式：侯双利，刘翠晶，杨利民，等 人参鲨烯环氧酶基因的克隆与序列分析［］吉林农业大学学报， ， ． Ｊ ． ２０１４ （）： ， ３６ ２ １４９１５２ １７０． ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＳｅｑｕｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＳｑｕａｌｅｎｅＥｐｏｘｉｄａｓｅＧｅｎｅｉｎＰａｎａｘｇｉｎ ｓｅｎｇ ， ， ， ＨＯＵＳｈｕａｎｇｌｉ ＬＩＵＣｕｉｊｉｎｇ ＹＡＮＧＬｉｍｉｎ ＨＡＮＭｅｉ ， ， ， ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎａｌＭａｔｅｒｉａｌｓ ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３０１１８ Ｃｈｉｎａ ： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｆｉｖｅｙｅａｒｇｉｎｓｅｎｇｒｏｏｔｔｉｓｓｕｅｗａｓｕｓｅｄａｓｍａｔｅｒｉａｌ．ＡｆｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｈｅｔｏｔａｌＲＮＡａｎｄｒｅｖｅｒｓ ， （ ） ｉｎｇｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ＳｑｕａｌｅｎｅＥｐｏｘｉｄａｓｅ ＳＱＥ ｇｅｎｅｗａｓｃｌｏｎｅｄａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅｄｂｙＲＴ－ＰＣＲｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ． Ｔｈｅｎｔｈｅｉｍｐａｃｔｆａｃｔｏｒｓｏｆｇｉｎｓｅｎｇｓａｐｏｎｉｎｓ′ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｐａｔｈｗａｙｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ ， ， Ｐａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇ ＳＱＥｗａｓｃｌｏｎｅｄｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ｗｉｔｈａｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｏｆ１６３６ｂｐ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇａ１６１１ｂｐｏｐｅｎ ｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅｔｈａｔｅ