实时定量PCR检测肺炎支原体2063位点点突变的方法学研究.pdfVIP

·猿苑苑源 · ·专题研究· 实时定量孕悦砸检测肺炎支原体圆园远猿位点点突变的方法学研究 李静宜，孙 岚，秦选光，董艳青，姜 越，李 丹，田秀君，辛德莉 摇 摇 【摘要】摇 背景摇 肺炎支原体（酝孕）是儿童社区获得性肺炎的主要病原体，对目前常用治疗药物———大环内酯 类抗生素的耐药率有升高趋势，而传统检测酝孕耐药株的方法耗时耗力。目的摇 建立一种快速诊断酝孕感染及耐药表型 的新方法。方法摇 采用实时荧光定量孕悦砸技术，以圆猿杂 则砸晕粤 为靶序列，设计不同基因型探针及引物，构建阳性质粒， 建立标准曲线。结果摇 实时荧光定量孕悦砸检测敏感圆园远猿粤质粒和耐药圆园远猿郧质粒的下限分别为远和远园 拷贝数，特异 性实验结果显示，仅生殖支原体出现扩增。与圆猿杂 则砸晕粤 巢式孕悦砸测序结果相比，实时荧光定量孕悦砸鉴定源猿株酝孕 临 床分离株圆园远猿位点等位基因的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均为员园园 。员圆份鼻咽拭子标本实时荧光定 量孕悦砸酝孕 阳性检出率为员园辕 员圆，耐药率为源辕 员圆，员份标本同时发现圆园远猿粤和圆园远猿郧位点。结论摇 本研究初步建立了一 种快速诊断酝孕感染并判断其耐药基因型的实时荧光定量孕悦砸方法，具有较高的灵敏度。 摇 摇 【关键词】摇 支原体，肺炎；大环内酯类；抗药性，微生物；聚合酶链反应；点突变 摇 摇 【中图分类号】砸猿苑缘郾圆 砸苑圆缘郾远猿员郾猿摇 【文献标识码】粤摇 凿燥蚤：员园郾猿怨远怨辕 躁郾蚤泽泽灶郾员园园苑 原怨缘苑圆郾圆园员猿郾员员郾园猿怨 摇 摇 李静宜，孙岚，秦选光，等援 实时定量孕悦砸检测肺炎支原体圆园远猿 位点点突变的方法学研究［允］援 中国全科医 学，圆园员猿，员远 （员员）：猿苑苑源 原猿苑苑苑援 ［憎憎憎郾糟澡蚤灶葬早责郾灶藻贼］ 粤 砸藻葬造原栽蚤皂藻 孕悦砸粤责责则燥葬糟澡 枣燥则 郧藻灶燥贼赠责藻 燥枣 圆园远猿 蚤灶 赠糟燥责造葬泽皂葬 孕灶藻怎皂燥灶蚤葬藻摇 蕴陨 允蚤灶早 原赠蚤，杂哉晕 蕴葬灶，匝陨晕 载怎葬灶 原 早怎葬灶早，藻贼 葬造援 月藻蚤躁蚤灶早 栽则燥责蚤糟葬造 酝藻凿蚤糟蚤灶藻 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻，月藻蚤躁蚤灶早 云则蚤藻灶凿泽澡蚤责 匀燥泽责蚤贼葬造，悦葬责蚤贼葬造 酝藻凿蚤糟葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，月藻蚤躁蚤灶早 员园园园缘园，悦澡蚤灶葬 摇 摇 【粤遭泽贼则葬糟贼】摇 月葬糟噪早则燥怎灶凿泽摇 酝赠糟燥责造葬泽皂葬 责灶藻怎皂燥灶蚤葬藻 （酝孕）蚤泽 葬 皂葬蚤灶 糟葬怎泽藻 燥枣 糟澡蚤造凿 糟燥皂皂怎灶蚤贼赠原葬糟择怎蚤则藻凿 责灶藻怎皂燥灶蚤鄄 葬援 酝孕 凿则怎早 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 糟燥皂皂燥灶原怎泽藻凿皂葬糟则燥造蚤凿藻泽蚤泽蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早，遭怎贼贼澡藻贼则葬凿蚤贼蚤燥灶葬造皂藻贼澡燥凿蚤灶泽责藻糟贼蚤灶早蚤贼泽则藻泽蚤泽贼葬灶贼 泽贼则葬蚤灶泽则藻造蚤藻泽 燥灶 贼蚤皂藻 糟燥灶泽怎皂蚤灶早葬灶凿造葬遭燥则原蚤灶贼藻灶泽蚤增藻责则燥糟藻凿怎则藻援 韵遭躁藻糟贼蚤增藻摇 栽燥 泽藻贼怎责 葬灶藻憎 则藻葬造贼蚤皂藻葬责责则燥葬糟澡枣燥则责燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶燥枣圆园远猿 蚤灶 圆猿杂 则砸晕粤燥枣 酝孕援 藻贼澡燥凿泽摇 栽澡藻葬造造藻造蚤糟凿蚤泽糟则蚤皂蚤灶葬贼蚤燥灶燥枣圆园远猿 责燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶燥枣 酝孕憎葬泽凿藻贼藻糟贼藻凿遭赠则藻葬造原贼蚤皂藻孕悦砸贼葬则早藻贼圆猿杂 则砸晕粤援 砸藻泽怎造贼泽摇 栽澡藻造蚤皂蚤贼泽燥枣 则藻葬造原贼蚤皂藻枣造怎燥则燥早藻灶蚤糟择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻孕悦砸凿藻贼藻糟贼蚤灶早 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻葬灶凿凿则怎早原则藻泽蚤泽贼葬灶贼 泽贼则葬蚤灶泽憎藻则藻远，远园 糟燥责蚤藻泽，则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 杂责藻糟蚤枣蚤糟 贼藻泽贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 燥灶造赠 皂赠糟燥责造葬泽皂葬 早藻灶蚤贼葬造蚤怎皂 葬皂责造蚤枣蚤藻凿援 悦燥皂责葬则藻凿憎蚤贼澡 贼澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 圆猿杂 则砸晕粤 灶藻泽贼藻凿孕悦砸泽藻择怎藻灶糟蚤灶早，贼澡藻泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠，泽责藻糟蚤枣蚤糟蚤贼赠，责燥泽蚤贼蚤增藻责则藻凿蚤糟贼蚤增藻增葬造怎藻，灶藻早葬贼蚤增藻责则藻凿蚤糟贼蚤增藻增葬造怎藻燥枣则藻葬造原贼蚤皂藻枣造怎燥则燥早藻灶鄄 蚤糟 择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 孕悦砸 蚤凿藻灶贼蚤枣赠蚤灶早圆园远猿 葬造造藻造藻 燥枣源猿 酝孕 蚤泽燥造葬贼藻泽憎藻则藻 葬造造 员园园 ，酝孕 责燥泽蚤贼蚤增藻 凿藻贼藻糟