流产布鲁氏菌BP26蛋白B细胞线性表位的鉴定.pdfVIP

摘 要 摘 要 发展造成巨大的的经济损失。该菌能经过皮肤粘膜和呼吸道等途径侵入机体引起感染和发 病。布鲁氏菌病的易感动物种类很多，其中羊、牛、猪最易感。BP26具有良好的抗原性， 是由细胞内向外释放的可溶性外周蛋白，相对于圃定的外膜蛋白，具有易于检测的的特点。 BP26在各布鲁氏菌种中的相似性较高，所以适合做布鲁氏菌病的诊断抗原。 为了对流产布鲁氏菌BP26蛋白进行抗原表位研究，设计了3个相互重叠15个氨基酸、 覆盖整个BP26蛋白的重叠短肽，经克隆并在大肠杆菌中实现了融合表达。用流产型布鲁 氏菌感染的阳性血清对3个融合蛋白进行免疫印迹分析，初步鉴定出BP26蛋白B细胞线 性抗原表位位于第5l～165aa处。根据上述结果，针对BP26 2(5l～165aa)短肽，将其分为5 个相互重叠10个氨基酸的短肽片段，进一步鉴定出了BP26蛋白B细胞线性表位位于第 109～141aa氨基酸区域。此基础上，又进行了第三轮的抗原表位筛选，针对BP26 2．4(109—141aa)短肽设计了6个相互重叠5个氨基酸的短肽片段，经磷酸化退火后与表达载 处。最后，为了进一步缩短BP26蛋白的B细胞线性表位，进行了第四轮的筛选，针对BP26 2．4．3(118～127枷和BP262．4．4(123～132aa)短肽设计了9个氨基酸的短肽片段，经磷酸化退 白B细胞线性表位区位于N端的123～127aa处。 综合上述研究结果，流产布鲁氏菌BP26蛋白的B细胞线性抗原表位区位于第 123～127aa区域，而此区域在其他布鲁氏菌中是一个高度保守的区域。对流产布鲁氏菌BP26 蛋白的B细胞线性抗原表位鉴定，从而进一步了解布鲁氏菌的抗原结构提供理论数据支持。 关键词：流产布鲁氏菌；BP26蛋白：B细胞线性表位；鉴定 Abstract IDENTIFICATIONOFLINEARB．CELL EPITOPEOFSTRUCTURALPROTEIN BP26OFBRUCELLA．ABoMUS Abstract BrucellosiscausedBrucellaisa and infecteddiseaseof by highlycontagiousacutely cattle， andwildruminant hasan on pigs，sheep，goats species．Iteconomicallydevastatingimpact affectedcountries，whereitcreateslossesto andconsiderableeconomic great productivity lossestothe have effects，isfrominsidethecellsoftheweek husbandryindustry．BP26good outsidesoluble release，relativetothefixedmembrane whichis tothe protein protein， easy characteristicsofthetest．BP26brucellosisinallstrainsof is SOsuitablefor similarityhigher， brucellosis diagnosticantigens． Inorderto thelinearB-cell ofstructural BP26ofBrucella． identify e