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α淀粉酶产生菌株(细菌)的分离纯化及检测.ppt
α-淀粉酶产生菌株（细菌）的分离纯化及检测 目的要求 了解利用选择培养基进行α-淀粉酶产生菌株分离的要求。 掌握α-淀粉酶产生菌株相关分离纯化的方法步骤——稀释平板菌落分离、挑菌保存、平板点植、观察测定透明圈等。 学习在平板上进行α-淀粉酶产生菌株的检测及产酶高低的判断。 平板分离用选择培养基 可溶性淀粉 10g； 1%豆粕粉浸出液 1000mL； Na2HPO4 .12H2O 2g； （NH4）2SO4 1g； CaCl2 0.5g； KCl 0.15g； 琼脂 20g pH 7.0~7.6 121.3℃灭菌20分钟 1%豆粕粉浸出液的制备 称取1%豆粕粉，加入适量水； 加热煮沸20min，过滤后定溶至1%的体积备用； 加热过程注意补水。 实验中器材的准备（需要包扎灭菌） 1ml无菌吸管 6支 99ml无菌水 1瓶（带玻珠，装于250ml三角瓶中） 9ml无菌水 4支（装于18×180mm试管） 不锈钢涂布器 3支 实验步骤及安排 今天完成稀释平板分离培养——倒平板、样品稀释、加样、涂布、恒温倒置培养（37℃ 48hr）； 2天后晚上，挑菌保存，点植平板培养24hr； 点植后24hr内检测淀粉酶产生量——测量平板上透明圈、菌落直径，并计算出比值。 实验结果 记录稀释平板分离的结果——细菌数、产淀粉的菌数及所点比例； 记录点植结果——挑取菌株编号、透明圈直径、菌落直径，并计算出透明圈、菌落直径比； 根据以上结果完成实验报告； 确定相关菌株（5~10株）保存好，准备进行下周摇瓶初筛试验。 * * *
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