尾加压素Ⅱ促进晶状体上皮细胞增殖的实验研究_临床医学论文.docVIP

尾加压素Ⅱ促进晶状体上皮细胞增殖的实验研究_临床医学论文 尾加压素Ⅱ促进晶状体上皮细胞增殖的实验研究_临床医学论文 作者：黄秀榕，祁明信，李坤鹏，陈义 【摘要】 　　目的：探讨尾加压素Ⅱ (urotensin Ⅱ, U对晶状体上皮细胞（lens epithelial cell, LEC）增殖的影响。方法：采用不同浓度的U与体外培养的LEC共同孵育后，用MTT法检测LEC的活性，并用3H 胸腺嘧啶（3H）掺入法检测LEC增殖。 结果：10组、10组、10组和10Ⅱ组的吸光度值均显著高于对照组(0.05，0.05，0.01，0.01)。10组、10组、10组、10组和10组的3H掺入放射活性均显著高于对照组(0.01)，分别是对照组的1.36倍、1.40倍、1.45倍、1.59倍和1.66倍。呈浓度依赖关系。结论：U具有促进LEC增殖的作用。 【关键词】 尾加压素Ⅱ； 晶状体上皮细胞；增殖；后发性白内障 　　Abstracty the effect of urotensin Ⅱ ( UⅡ)，a new biological activity substance, on proliferation of lens epithelial cell(LEC). METHODS: Different concentrations of Uyl thiazolyl tetrazolium(MTT). The proliferations of LEC were detected via 3HTdR.RESULTS: The absorbences of groups 109mol/L UⅡ, 108mol/L UⅡ, 107mol/L UⅡ and 106mol/L UⅡ were higher than that in control group (0.05，0.05，0.01，0.01); the radioities of 3HTdR in groups 1010mol/L, 109mol/L UⅡ, 108mol/L UⅡ, 107mol/L UⅡ and 106mol/L UⅡ were higher than that in control group (0.01), which were 1.36, 1.40, 1.45, 1.59 and 1.66 times respectively, with a dosedependent manner. CONCLUSION: UⅡ can induce proliferation of LEC.  　　KEYWORDS: urotensin Ⅱ; lens epithelial cell; proliferation; after cataract　　0　引言 　　人尾加压素Ⅱ（human urotensin Ⅱ, hU）具有多种生物学效应[1, 2]。体内多种组织中含有U，我们的研究也发现，眼部各组织均含有U。不少研究还表明，U具有促进细胞增殖的作用，可使大鼠心肌成纤维细胞、气道平滑肌细胞、肾系膜细胞和血管平滑肌细胞等发生增殖[3]。白内障囊外摘除联合人工晶状体植入术后的主要并发症之一是视力再度下降，称为后发性白内障 (after cataract)。这是由于手术后残留的晶状体上皮细胞（lens epithelial cell, LEC）发生增殖、移行，使晶状体后囊膜发生混浊所致。本文研究U对晶状体上皮细胞增殖的影响，探讨后发性白内障的发生机制并寻求防治方法。 　　1　材料和方法 　　1.1　材料 　　采用健康新鲜小牛眼，无菌操作取晶状体前囊膜，用胰蛋白酶消化法在37℃，5%CO2培养箱中作晶状体上皮细胞原代和传代培养，取第3代细胞进行如下实验。hU为美国Sigma公司产品，3H 胸腺嘧啶（3H）购自上海原子核研究所，H7，PD98059，W7，尼卡地平(nicardipine)均系美国Sigma公司产品，二甲基亚砜（DMSO）系美国Amresco公司产品，DMEM培养基为美国GIBCO公司产品，2,5二苯基恶唑（PPO）及1,4双（5苯基恶唑基）苯（POPOP）为中国医药集团上海化学试剂公司产品。全自动酶标读数仪(购自美国BioTek ELX808)。 　　1.2　方法 　　1.2.1　LEC活性的检测 　　取第3代培养的LEC，台盼蓝染色，计算活细胞数并调整细胞密度至5×108个/L，在37℃，5% CO2培养箱中常规培养24h，使细胞同步化。将实验分成6组，每组8个样本。对照组在LEC内加入DMEM培养液，10组，10组，10组，10组和10组分别在对照组基础上加入终浓度为10和10的hU。置CO2培养箱中继续培养72h后