年产10吨穿山龙总皂苷提取工艺设计.docVIP

1 前言 1.1 原料及产品简介 1.1.1 穿山龙简介 穿山龙(Dioscorea Nipponica Makino)，别名穿地龙、地龙骨、金刚骨、鸡骨头、野山药生于山坡林边、灌木林下及沟边。主产辽宁、吉林、黑龙江、河北、内蒙古、山西、陕西。采制 春、秋季采挖挖取根茎，除去须根、外皮（栓皮），晒干。性状根茎呈圆柱形、类圆柱形，稍弯曲，有指状分枝，长短不一，直径0.3～1.5cm。表面棕色或黄色，两侧散生须状细根或细根断痕。质坚硬，断面平坦，白色或类白色，粉性。气微，味苦涩。,收于中国药典，具祛风除湿、活血通络、清肺化痰等多种功效。 其有效成分为甾体皂苷, 其中水不溶性皂苷主要为薯蓣皂苷、纤细皂苷,皂苷元均为薯蓣皂苷元。穿山龙皂苷具有改善冠脉循环、增加冠脉流量、抗动脉粥样硬化等作用，其镇咳作用的有效成份主要为水溶性皂苷，祛痰作用则为水不溶性皂苷。皂苷按皂苷配基的结构分为两类：甾皂苷其皂苷配基是螺甾烷的衍生物，多由27个碳原子所组成（如薯蓣皂苷）。这类皂苷多存在于百合科和薯蓣科植物中三萜皂苷其皂苷配基是三萜的衍生物，大多由30个碳原子组成。三萜皂苷分为四环三萜和五环三萜。这类皂苷多存在于五加科和伞形科等植物中。多数皂苷能降低液体（水）的表面张力，具有起泡沫性质和乳化剂作用，能用作清洁剂，还有溶血和毒鱼的作用。:一是作为制备薯蓣皂苷元的前体。由于薯蓣皂苷元的需求量巨大，薯蓣皂苷主要用作生产薯蓣皂苷元的原料。二是直接作药用。薯蓣皂苷有明显的止咳、祛痰、平喘活性，用于治疗冠心病，副作用小，可减少心绞痛。成都生物所用黄姜研制的地奥心血康，具有调节新陈代谢地作用，用于治疗动脉硬化，对心血管系统的疾病有转好的疗效。国内己有数家工厂以黄姜为原料，提取总薯蓣皂苷作为临床上的降血脂药物。1978年，江苏省植物研究所研制了盾叶“冠心宁”，临床治疗冠心病、心绞痛有一定疗效。1998年，武汉植物园的崔天义研究发现:黄姜的正丁醇提物，有效成分是薯蓣皂苷，在浓度为30ml/L时，在48h内，灭钉螺率达100%，是杀灭钉螺并预防血吸虫病理想的“环保药物”。原始薯蓣皂苷的26位连接一个葡萄搪，能溶于水。水溶性好更利于拓宽应用领域。 1.1.3 穿山龙总皂苷的质量标准 从中提取分离出的，含量达到%，性味归经苦，平，，分布于我国东北、西北、华北、华中和西南等省区.3.1 水煎法提取 准确称取25.0 g预处理恒重的穿山龙粉末，按照溶剂体积：原料质量=8：1，及8倍量水常温浸泡12 h。转入回流瓶中提取，在90℃下回流提取3次，每次2 h。将每次所得提取液过100目筛，合并提取液并离心（3500 r/min,15min）g生药/mL的上样液备用。 （1）取预处理完备的D-101大孔吸附树脂一定量，装入玻璃中2）将上述上样液倒入树脂柱中。打开柱阀，当有上样液流出时，关闭柱阀，使之与树脂静态吸附12 h。以1.0 mL/min流速进行动态吸附，并将流出液重吸附一次，同时对重吸附流出液进行E试剂定性检测和比色法定量检测； （3）采用定量蒸馏水以2.0 mL/min的流速洗脱树脂，弃去水洗脱液； （4）用50%的乙醇以2.0 mL/min的流速洗脱树脂，流出液每50 mL收集一份。并用E试剂定性检测。当洗脱液与E试剂反应基本不显红色时，同时对洗脱液中的皂苷元进行定量检测。直到流出液中皂苷元含量小于3.0 μg/mL时，停止洗脱。 （5）合并洗脱液减压浓缩，将浓缩液转入干燥恒重的培养皿中60℃干燥。 （6）将干燥好的产物称重，研钵研成粉末，储存备用。 1.3.2 超声波辅助乙醇法提取 准确称取25.0 g预处理恒重的穿山龙粉末，用12倍量60%乙醇常温浸泡12h，放入超声波容器中进行提取。设定条件如下：时间30min、功率100W、频率40kHz、温度40℃、提取次数3次，溶剂量12倍（第1次），6倍（第2，3次）。每次提取后过100目筛，合并提取液并离心 （3500 r/min,15min）.3.3 乙醇提取法 准确称取25.0 g预处理好的干燥恒重的穿山龙粉末，用6倍量60%乙醇在60℃回流提取3次，每次2 h。所得提取液过100目筛，合并并离心（3500 r/min,15min）.3.4 自然发酵乙醇提取法 （1）预发酵醇提取法制备穿山龙总皂苷提取液 准确称取25.0 g预处理恒重的穿山龙粉末，用4.8倍量及120 mL蒸馏水浸泡。转入37℃恒温箱中恒温发酵12 h。发酵后补加无水乙醇180 mL，转入提取器中，在60℃回流提取2h，2、3次提取采用6倍量60%乙醇60℃回流提取，提取时间为2h，将所得提取液过100目筛，合并提取液并离心（3500 r/min,15min）ZTC澄清剂的最佳条件澄清处理后，离心、抽滤所得澄清液按照2.7.1中相同的方法上处理好的D-10