五味子多糖提取纯化及功能性研究本科毕业设计（论文）.docVIP

硕士学位论文 五味子多糖提取纯化及功能性研究 Classified Index: U.D.C: Dissertation for the Master Degree in Engineering STUDIES ON EXTRACTION AND FUNCTIONALITY EFFECT OF THE POLYSACCHARIDES IN FRUCTUS SCHIZANDRAE 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。 作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权　　 　 　大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 涉密论文按学校规定处理。 作者签名： 日期： 年 月 日 导师签名： 日期： 年 月 日 目录 摘要………………………………………………………………………………………………... V Abstract…...……………………………………………………………………………………...VII 1 引言 1 1.1 五味子的研究概况 1 1.1.1 五味子品种考证 2 1.1.2 五味子化学成份研究 2 1.1.3 五味子的功能 2 1.1.4 五味子在食品工业中的应用及其开发前景 5 1.2 多糖的研究概况 5 1.2.1 多糖的来源 6 1.2.2 多糖的生物活性 8 1.2.3 多糖的提取和纯化 10 1.2.4 目前多糖研究中存在的问题 12 1.3 立题意义及研究内容 13 2 材料与方法 15 2.1 材料和仪器 15 2.1.1 原料 15 2.1.2 试剂 15 2.1.3 仪器设备 16 2.2 试验方法 16 2.2.1 五味子多糖的提取工艺优化 16 2.2.2 五味子多糖的分级纯化 20 2.2.3 五味子多糖得抗氧化性研究 21 2.2.4 五味子多糖对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的影响 22 3 结果与分析 25 3.1 五味子多糖提取工艺参数的选择 25 3.1.1 提取次数对得率的影响 25 3.1.2 提取料液比对得率的影响 25 3.1.3 提取温度对得率的影响 26 3.1.4 提取时间对得率的影响 27 3.1.5 提取pH值对得率的影响 28 3.1.6 影响提取得率各因素正交分析 28 3.1.7 响应面分析 29 3.1.8 参数选择 34 3.2 五味子粗多糖纯化结果 34 3.2.1 醇沉处理效果 34 3.2.2 脱脂效果 35 3.2.3 复合法脱蛋白质效果 35 3.2.4 脱色与透析效果 35 3.2.5 苯酚硫酸法测五味子多糖的标准曲线 36 3.3 五味子多糖的分级纯化 36 3.3.1 DEAE52对五味子多糖的分级结果 36 3.3.2 Sephadex G-100对SP-2和SP-4的层析结果 37 3.3.3 SP-2a和SP-4b纯度鉴定 37 3.4 SP-2和SP-4的抗氧化性研究 38 3.4.1 SP-2和SP-4对DPPH·清除试验 38 3.4.2 SP-2和SP-4对超氧自由基的清除试验 39 3.5 SP-2和SP-4对人肝癌细胞HepG2增殖的影响 40 3.5.1 肝癌细胞HepG2的生长曲线 40 3.5.2 五味子多糖SP-2a对肝癌细胞HepG2的抑制作用 41 3.5.3 五味子多糖SP-4b对肝癌细胞HepG2的抑制作用 43 3.5.4 形态学观察结果 44 4 讨论 45 4.1 五味子多糖提取工艺的优化 45 4.1.1 提取工艺优化 45 4.1.2 除杂工艺优化 46 4.2 五味子多糖纯化 47 4.3 五味子多糖的抗氧化能力分析 48 4.4 SP-2a和SP-4b对HepG2的影响 49 4.5 展望 50 5 结论 51 5.1 确定了五味子多糖的最佳提取工艺 51 5.2 五味子多糖的分级纯化 51 5.3 SP-2a和SP-4b的抗氧化研究 51 5.4 SP-2a和SP-4b对HepG2凋亡影响 52