胃癌诱导腹膜间皮细胞凋亡促进腹膜转移地研究.pdfVIP

第8届全国胃癌学术会议暨首届阳光长城肿瘤学术会议 那迪姜成钢刘福囝王振宁徐惠绵 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科辽宁沈阳110001 通讯作者：徐惠绵，xuhuimian@126．com 腹膜转移是限制进展期胃癌根治术后成功率的瓶颈，也是最常见的复发形式，是胃癌患者的主 要死亡原因。腹膜为癌细胞转移提供了所需的炎性介质，在癌腹膜转移早期，由瘤细胞，成纤维 细胞，间皮细胞等分泌的细胞因子作用于间皮细胞，使间皮细胞在形态结构功能上发生改变，为 腹膜转移提供“土壤”。但目前我们对于腹膜转移的机制仍然知之甚少。 180多年前间皮细胞就已经被人发现，但直到最近20年人们才逐渐认识到间皮细胞对于维 持脏器浆膜层功能和完整性的重要作用。间皮细胞能够感知周围微环境的信号，并作出反应，它 能合成分泌氨基葡聚糖和多种表面活性剂，辅助并保护脏器浆膜面的相互运动。它们还可以转运 液体和某些微粒子在浆膜面的转运。在外界信号的作用下，间皮细胞合成分泌多种介质参与炎症、 免疫、组织修复等。除此以外，间皮细胞完整连续的紧密排列还能抵御肿瘤细胞对腹膜的侵袭。 正常的腹膜是由单层间皮细胞及其下方的细胞外基质组成。扫描电镜下，腹膜由单层扁平的、 排列紧密的、直径约为10—15微米的间皮细胞覆盖，表面密生着无数直径约1．0微米的微绒毛。 间皮细胞间连接致密，细胞边界密不可分。间皮细胞能够抑制癌细胞对覆膜的浸润，同时又受到 癌细胞分泌的多种细胞因子的影响而被破坏。目前的研究发现，在癌细胞粘附到间皮细胞之前， 问皮细胞就已经发生了改变：间皮细胞变圆或半圆形，进而细胞脱落导致间皮下结构暴露，形成 裸区，癌细胞进而粘附种植。胃癌细胞诱导腹膜间皮细胞的损伤改变很可能与细胞凋亡相关。 材料与方法：腹膜间皮细胞与胃癌细胞共培养，分别在光镜、电镜下观察间皮细胞形态，流 式细胞仪检测间皮细胞调亡情况，western检测人间皮细胞抗凋亡蛋白Bcl一2的表达、促凋亡蛋 白Bax的表达情况。 第8届全国胃癌学术会议暨首届阳光长城肿瘤学术会议 结果：(1)对间皮细胞进行光镜和荧光染色发现正常间皮细胞呈多边形，胞质丰富，细胞排列 致密，细胞之间密不可分呈现典型的鹅卵石样外观。而接触胃癌细胞后的间皮细胞变细，胞质减 少，细胞排列松散，细胞间连接打开，有的细胞受损脱落，脱落后出现大片裸区。(2)进一步研 究发现对照组的间皮细胞核形态规则，核仁清晰，核染色质均匀分布细胞核内。经胃癌细胞处理 后细胞膨胀变圆，染色质高度凝聚，核膜皱缩，但完整。内质网膨胀。边缘化浓缩呈境界分明的细 小团块状沿核膜内侧排列，部分细胞核解体，核仁肖失，胞膜下陷，形成由质膜包裹内含完整的 细胞器、核碎片等细胞内容物的凋亡小体。(3)流式细胞仪检测胃癌细胞上清处理组间皮细胞生 长抑制，并出现凋亡，其程度与时间成正相关。(4)与对照组相比，胃癌细胞能明显抑制间皮细 胞抗凋亡蛋I刍Bcl一2的表达；并能增加促凋亡蛋l刍Bax的表达。 结论：明确了在胃癌细胞粘附到间皮细胞之前所释放的细胞因子对腹膜间皮细胞的损伤模型， 发现在腹膜转移早期胃癌细胞可以通过诱导间皮细胞凋亡对腹膜问皮细胞构成损伤和破坏，证明 间皮细胞凋亡在胃癌腹膜转移中发挥了重要作用。