HPLC法测定大黄虫片中芍药苷的含量.docVIP

HPLC法测定大黄虫片中芍药苷的含量【摘要】? 目的 建立高效液相色谱法测定大黄虫片中芍药苷含量的方法。方法 选用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(1486)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30 ,检测波长为230 nm。结果 芍药苷在0.10～0.90 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r＝0.999 7,平均加样回收率为99.98%,RSD＝0.81%(n＝6)。结论 本法操作简便,准确,重复性好,精密度高,可用于大黄虫片的质量控制。 【关键词】? 大黄虫片；芍药苷；高效液相色谱法；含量测定 ??? Abstract：Objective To establish a HPLC method for determining the content of paeoniflorin in Dahuang Zhechong Tablets. Methods Stationary phase was C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm), mobile phase was acetonitrice-0.1% phosphoric (14∶86), detection wavelength was 230 nm, flow rate was 1.0 mL/min and column temperature was 30 ℃. Results There was good linear relationship between the concentration of paeoniflorin and area integral value in the range of 0.10～0.90 μg, r＝0.999 7. The average recovery was 99.98% with RSD＝0.81% (n＝6). Conclusion This method is simple, accurate, with good reproducibility and high precision, and can be used to control the quality of Dahuang Zhechong Tablets effectively. ??? Key words：Dahuang Zhechong Tablets；paeoniflorin；HPLC；content determination???? 大黄虫片由熟大黄、土鳖虫、水蛭、白芍等12味中药组成,具有活血破瘀、通经消痞功效,用于瘀血内停,腹部肿块,肌肤甲错,目眶黯黑,潮热羸瘦,经闭不行。本试验采用高效液相色谱(HPLC)法测定大黄虫片中芍药苷的含量,可更好地控制该制剂的质量。 　　1? 仪器与试药 ??? Agilent1100系列高效液相色谱仪：G1311A四元泵, G1313A自动进样器,G1379A脱气机,G1314VWD检测器, Agilent1100化学工作站；UV-2201型紫外-可见分光光度仪； BUG40型超声波清洗发生器。 ??? 大黄虫片及不含白芍药材的阴性对照品(广西玉林制药有限责任公司技术中心提供)；芍药苷对照品(批号110736- 200628,供含量测定用,中国药品生物制品检定所提供)。乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯。 　　2? 方法与结果 　　2.1? 色谱条件 ??? Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(1486)[1],流速1.0 mL/min,柱温30 ,检测波长为230 nm,进样量为10 μL。 　　2.2? 溶液的制备 　　2.2.1? 对照品溶液的制备? 　　精密称取芍药苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含芍药苷40 μg的溶液,作为对照品溶液。 　　2.2.2? 供试品溶液的制备? 　　取本品20片,研细,精密称取2 g,置锥形瓶中,加稀乙醇50 mL,超声提取(功率220 W,频率50 Hz) 40 min,放冷,过滤,蒸干。残渣加稀乙醇适量使溶解,通过中性氧化铝柱(100～200目,4 g,内径15 mm),以稀乙醇洗脱,收集洗液50 mL,蒸干,残渣用稀乙醇溶解,并转移至20 mL量瓶中,用稀乙醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,即得。 　　2.2.3? 阴性对照溶液的制备? 　　按处方比例和工艺,制成不含白芍药材的阴性对照品,按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液并测定。 　　2.3? 空白试验 　　按上述色谱条件,吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,分别注入