家兔颈部动脉和神经的分离及减压神经放电的引导实验报告.docVIP

中央民族大学生命与环境科学学院 生理学实验报告 2011年10月28日 【目的与要求】 1.学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。 2.学习在体神经冲动引导与记录的方法，理解主动脉神经的生理功能。 3.掌握记录和测量家兔动脉血压的直接测量方法 。 4.观察神经和体液因素改变对家兔动脉血压调节的影响，并分析该些因素的作用机制。 【实验原理】 主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经，又称减压神经。神经传入冲动的频率，在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少，从而使压力感受性反射增强或减弱，以维持动脉血压的相对稳定。由于家兔主动脉神经独成一束，易于分离，故常用家兔为实验动物，进行主动脉神经冲动的引导与血压实验。 在正常的生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦-主动脉弓压力感受器反射尤为重要。此反射即可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于分离与观察其作用。 【实验动物及器材】 家兔、兔手术台，常用手术器械，止血钳、眼科剪、支架、气管插管、Pc-Lab生物信号采集系统、保护电极、纱布、棉球、丝线、 20ml注射器、20%-25%氨基甲酸乙酯，肝素，去甲肾上腺素，生理盐水；RM6240生物信号采集系统，手术剪1把，眼科剪1把，止血钳，镊子，电刺激连线，兔手术台，注射器及针头，血管插管，动脉夹，血压换能器，铁架台，婴儿秤，输液装置，照明灯，有色丝线； 【实验步骤】 1、实验动物准备 1）麻醉：取家兔一只称重，按4-5ml/Kg(1g/Kg)耳缘静脉注射20%-25%氨基甲酸乙酯进行麻醉。 2）固定剪毛：背位固定在兔手术台上，剪去颈部手术视野中的被毛。 3）手术分离血管与神经 A、颈部皮肤切口5-7cm，分离皮下组织 B、分离肌肉层：钝性分离 C、行气管插管：倒“T”切口，插管固定 D、分离血管与神经：一侧：迷走神经(1)、主动脉神经（2）、颈动脉（1） 另一侧：迷走神经(1)、颈动脉(3)（插管用） 2、连接仪器引导减压神经放电活动 打开Pc-Lab生物信号采集系统，连接引导电极在第一通道中，设置通道功能为神经放电，输入实验相关信息，采样观察减压神经放电活动。 3、实验装置与连接：① 将压力换能器固定于铁支架上，使换能器的位置尽量与实验动物的心脏在同一水平面上。然后将换能器输入至RM6240生物信号采集系统一通道。②压力换能器的另一端与三通管相连。三通管的一个接头将与动脉插管相连。在将动脉插管插入左颈总动脉前，先用盛有肝素的注射器与三通管另一接头相连，旋动三通管上的开关，使动脉插管与注射器相通，推动注射器，排空动脉插管中的气体，使动脉插管内充满肝素溶液，然后关闭三通管。 4、仪器调试：在“实验”菜单中选择“循环——兔动脉血压调节”。 双击一通道，调节增益、采样参数，使基线归零，令图形位于屏幕中央，便于观察。 5、动脉插管：在左颈总动脉的近心端夹一动脉夹，然后结扎其远心端(保留此结扎线头)，在动脉夹与结扎之间一般应相距2cm以上。 在结扎端的下方用眼科剪作一斜口，向心脏方向插入动脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处(注意此处务必扎紧)，并以远心端丝线将插管缚紧固定，以防插管从插入处滑出。 6、静脉插管：用一丝线将右侧颈外静脉远心端提起，用眼科剪在其下方做一斜口，向心脏方向插入静脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处，并以远心端丝线将插管缚紧固定，结扎血管同时防插管从插入处滑出，静脉插管成功后立即开始输液，并将输液速度调慢。 7、记录血压：一切准备完毕，移去动脉夹，启动记录按钮，开始记录血压曲线。 8、实验观察： （1）记录正常血压曲线。 （2）用血管夹夹闭右侧颈总动脉20s，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。 （3）静脉注射去甲肾上腺素：从右侧颈外静脉注射0.3ml去甲肾上腺素，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。 （4）刺激主动脉神经,：以5V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧主动脉神经，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。 （5）刺激迷走神经：以1V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧迷走神经，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。 【实验结果】 1.夹闭一侧颈总动脉血压变化： 2.按压颈动脉窦是血压变化： 3.刺激迷走神经： 4.刺激迷走神经中枢端： 5.刺激迷走神经外周端： 6.刺激减压神经： 7.刺激减压神经外周端： 8.刺激减压神经中枢端： 9.注射肾上腺素： 10.注射乙酰胆碱