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转基因植物药用蛋白研究与生产 游兰英 刘广发1 1厦门市医药研究所 2厦门大学生命科学学院 [摘要】利用转基因植物生产药用蛋白因有成本低、可直接食用而获得相应的免疫力、保藏和运输方便等 优点受到国内外科学家的广泛重视。目前已经能够生产包括疫苗、抗体和血液替代品等药物蛋白．本文简 要评述国内外利用转基因植物生产药用蛋白的基本方法、研究现状及发展趋势。 [关键词]转基因植物；药用蛋白；疫苗 近20年来随着植物转基因技术日臻成熟，用转基因植物生产药物蛋白已经成了国际上新兴的研究领 域和极具发展潜力的产业，它具有产物天然和成本低廉等突出特点。以下就该领域的主要进展作一简要介 绍。 1转基因植物生产药用蛋白的优点 现有的生物反应器系统包括：微生物发酵系统、动物细胞和转基因动物系统以及转基因植物系统。 细菌等微生物细胞缺乏真核生物的蛋白(多肽)加：亡修饰体系，而且微生物发酵还需要庞大的设备投资。 以转基因动物作为生产系统虽然成本较低，但却容易引起伦理争议，同时还可能含有潜在的病原。1986至 1990年间，科学家建立了植物表达系统，成功地表达了人生长激素融合蛋白、干扰素、人血清白蛋白和功 能抗体等蛋白，成功地证明了植物具有生产复杂的、有药效的哺乳动物蛋白的潜力。 利用转基因植物生产药物，与其他生产系统相比，具有如下明显的优越性【1，”： ①转基因植物细胞经组织培养，植株再生较容易； ②植物基因工程疫苗的生产成本低。据估算，在250平方米的温室中利用莒蓿生产免疫球蛋白G(IgG) 的成本约为每lg 500—600美元．与之相比从杂交瘤中提取抗体的成本为每195000美元； ③转基因植物具有完整的真核表达系统，能对真核聋白质疫苗进行准确的翻译后加工修饰．保持r 自然状态的免疫原性； ④植物基因工程疫苗保存于植物的器官中，不需提取便可直接食用而获得相应的免疫力，免去提纯 和接种，保藏和运输也都很方便； ⑤由于植物病毒不感染人类，因此利用植物生产疫苗更为安全。 2转基因植物生产药用蛋白的基本方法 转基因植物生产药用蛋白主要有两种方法：构建能稳定表达整合药用蛋白基因的转基因植物体系Ⅲ， 以及建立瞬时表达的转基因植物体系【4l。 2．1能稳定表达的转基因植物系统 通过农杆菌介导法和基因枪法，可能把编码药用蛋白的外源基因导入植物细胞的基因组中，在一定条 件下受体植物可稳定表达药用蛋白，并把这种性状遗传给子代。甚至通过构建含有特异性表达启动子的植 物表达载体，可以使外源基因在植物的特定组织或器官，如籽粒或块茎等天然蛋白贮藏器官中稳定表达。 活性仍能达到收获时的一半。 2．2瞬时表达的转基因植物系统 瞬时表达系统是利用植物病毒为载体将编码药用蛋白的基因插入植物病毒基因组中，再用此重组病毒 感染植物，药用蛋白基因随病毒在植物体内复制、装配而高效表达。目前主要的瞬时表达系统是重组病毒 载体法，它将目的基因克隆到一种植物病毒的基因组中，在一强启动子控制下该重组病毒就熊够迅速侵染 术一般只能表达分子量在30kDa以下的蛋白质。但瞬时表达系统易于检测外源蛋白的结构和表达，能及时 发现和解决问题。人们期望利用基因枪法和农杆菌法对重组病毒载体进行技术改进。 3转基因植物哇产药用蛋白研究进晨 21l 迄今科学家已经在烟草、玉米、大豆、苜蓿、向日葵、水稻、小麦以及油菜建立了转基因药物植物系 统”1，能够生产的药物蛋白，主要包括疫苗、抗体和血液替代品等。 3．1口服疫苗 许多科学家的研究表明，不少细菌和病毒等病原体的抗原基因可以在转基因植物中正常表达，且表达 的抗原仍具有其本身的免疫原性，这为转基因植物作为疫苗生产系统提供了良好的理论基础吲。1992年． 抗原基因成功地在植物中获得表达。 通过转基因植物进行疫苗制备主要有三条途径：悬浮培养的植物转化细胞、植物转化组织以及转基因 植株。植物中表达的抗原经食用后为何还能引起人和动物的免疫反应?这是个尚未完全解开的奥秘，但显 然植物细胞的细胞壁可能正好是外源抗原的保护伞。由于具细胞壁，转基因植物在胃分泌物中相对还比较 安全，当细胞壁在肠中被破坏溶化时，外源抗原则逐渐释放出来，从而激活了哺乳动物的免疫系统州。 已报道的转基因植物疫苗大致可分为4类：细菌疫苗、病毒疫苗、寄生虫疫苗和避孕疫苗。目前科学