幽门螺杆菌尿素酶B亚单位W%2fO%2fW型复乳的制备与免疫原性研究.pdfVIP

容到10ml(酶的浓度为0．01mg／m1)，进样20ul。酶在药物的保留时间无吸收峰。 溶液，再加入lml的冰醋酸，超声10min溶解，三蒸水稀释，用0．22um的微孔滤膜 过滤，进样20ul(n=3)。药物在三种不同释放介质中平均回收率分别为98．74％、101．6％、 101．7％，RSD分别为1．41％、2．6％、2．7％。 5．1％、3．5％、1．4％。 (7)检测限检测限为8ng，ml，信噪比S／N≥3。 (8)MBZ瓜尔胶骨架片体外释放试验选用四种不同含量瓜尔胶的MBZ骨架片作释药试 22um的微孔滤膜 瓶中，加入lml冰醋酸，超声10min溶解，再以三蒸水定容。用0 过滤，进样20ul。根据标准曲线回归方程计算释药百分率。含瓜尔胶10％、20％、 26．26％、3．33％、1．20％(人工结肠液中不含酶)。表明含不同量的瓜尔胶的MBZ 骨架片在三种不同释放介质中释药百分率随着瓜尔胶量的增大而减小。 PBS为释放介质进行释药百分率的测定。实验结果表明含30％， 乳H露糖苷酶的pH6．8 小含酶的明显增加，含30％瓜尔胶的骨架片在12h释药百分率已达89．60％，24h释药百 分率为91．30％，约为不含酶的30倍，而40％瓜尔胶的骨架片24h释药百分率为54．11％， 约为不含酶的45倍。 讨论 含瓜尔胶10％的骨架片在人工胃液中崩塌，5h释药百分率60％，冈此不适合作为 结肠靶向制剂。含瓜尔胶20％的骨架片，在不加酶的人工结肠液中分解成两到三片，5h 释药百分率也超过了20％，因此也不太适合作为结肠靶向制剂。含瓜尔胶30％，40％的 骨架片，在人工胃液、人工肠液以及不加酶的人工结肠液中片剂保持完整而且5b释药百 分率均小于5％，一旦在人工结肠液中加入酶，24h释药百分率分别为54．11％、91．30％， 两者在体外均表明了结肠靶向特性，含瓜尔胶30％的骨架片优于含瓜尔胶40％的骨架片。 可以预料骨架片中瓜尔胶达到一定比例，!j片剂接触体液后形成凝胶层，便能保证 MBZ骨架片在胃肠道内保持完整而几乎4i释放药物，一H到达结肠部被结肠中特有的多 糖酶降解，药物释放，达到结肠靶向的目的。 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位W／0／W型复乳的制备及免疫原性研究1 高志刚邹全明郭刚 郭桐生 曾韦琨 (第三军医大学临床微生物及免疫学教研室，重庆400038) 幽门螺杆菌(nelicobacter 75 中心和美国NIH相继通过决议，宣布Hp为胃炎、胃和十二指肠溃疡的病因，同时也是第 一类致癌因子…，在大量人群中预防和控制HP感染，唯一有效的方法就是疫苗接种“’。 动物实验表明，重组尿素酶B亚单位(rUreB)不仅具有良好的免疫活性、预防性，而且 免疫接种后可清除体内该菌的感染…，注射接种无效，只有通过黏膜接种才能起到免疫 保护作用。目前，国内外对尿素酶的研究多集中于口服接种，但由于胃内pH较低，并含 大量的胃蛋白酶，疫苗蛋白在胃内会被消化、分解，或由于低pH引起变性，因此不能直 接口服。 w／o／w型复乳是将水包油(o／w)初乳经二次乳化进一步分散在水相形成的多相分散 体系。利用乳化技术制备复乳(w／o／w)作为水溶性疫苗的药物载体，疫苗蛋白被油膜包 裹后可减少在胃肠道的水解破坏，增加药物稳定性，降低副作用，增加药物在胃肠道的 接触时间，并具有靶向及缓释作用，从而增强疫苗的免疫效果”。本文试制了幽门螺杆 菌疫苗复乳，并对复乳的物理性质、稳定性及其免疫原性进行了研究，为开发新型疫苗 蒯型，研制高效、廉价、使用方便的疫苗奠定了基础。 材料和方法 材料 1．1主要试剂 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位疫苗，本室构建、表达、发酵、纯化”…… 碘化钠溶液(Na”5I)，中国核动力研究所设计院第一研究所 体石蜡、Span一80、Tween一80、明胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)均为分析纯 辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG，武汉博士得生物工程有限公司。 AssociatesInc。 生物素