实验6细菌的芽孢荚膜染色.ppt

实验六细菌芽孢、荚膜的染色及观察 一、目的 1、学习并掌握芽孢染色法； 2、初步了解芽孢杆菌的形态特征； 3、学习并掌握荚膜染色法。 二、基本原理 芽孢染色法的基本原理是：用着色力强的染色剂在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内，进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍然保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱、不易着色；通常用衬托染色法染色。使菌体和背景着色，而荚膜不着色，在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。 三、器材 1、菌种 枯草芽孢杆菌约2d营养琼脂斜面培养物；固氮菌约2d无氮培养基琼脂斜面培养物； 2、染色剂 5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶液， 绘图墨水、95%乙醇、石炭酸复红染液等； 3、仪器或其他用具 木夹子、显微镜、 酒精灯、 载玻片、盖玻片、香柏油、 二甲苯、擦镜纸等 四、操作步骤 1、细菌的芽孢染色 涂片 、干燥、固定 孔雀绿水溶液染色5～7min 水洗 番红水溶液染2min、水洗、干燥、镜检。 2、细菌的荚膜染色 涂片 自然干燥 1 ～ 2滴95%乙醇固定 石炭酸复红染液染色1～2min，水洗，自然干燥 加墨水，涂层，自然干燥，镜检。 荚膜染色的涂片方法 细菌的芽孢 五、实验报告 1、绘图表示芽孢杆菌的形态特征（注意芽 孢的形状、着生位置及芽孢囊的形状特 征）； 2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和荚 膜的形态； 3、通过荚膜染色法染色后，为什么被包在 荚膜里面的菌体着色而荚膜不着色？ 六、预习 放线菌的形态观察。 霉菌的形态观察。 * *