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高考生物试题中有关染色剂使用的考查 1 ?DNA和RNA的染色鉴定 甲基绿和吡罗红是混合染色剂。 甲基绿是具有金属光泽的绿色微结晶或亮绿色粉末。溶于水 ，显蓝绿色。稍溶于乙醇，不溶于戊醇。吡咯在盐酸作用下聚合成为吡咯红，可与 RNA结合呈现红色。 这两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以观察到DNA和RNA在细胞中的分布情况。 注意：①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进人细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。② 2种染色剂要混合使用，而且要现配现用。 2 健那绿染液与线粒体的观察 健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料，线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态( 即有色状态)呈蓝绿色 ， 而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态 。因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。 线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时，通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。 3.? 碱性染料与染色体的观察 生物实验中所用的染料，按其来源可分为天然染料和人工染料两大类。人工染料根据其主要化学成分的性质，又分成碱性染料、酸性染料和中性染料三大类，其碱性、酸性和中性是由染料中有色部分的性质所决定的。若染料的有色部分为阴离子，即为“酸性”染料；若染料的有色部分为阳离子，则称为“碱性”染料；若染料的阴、阳离子均有颜色，则称为“中性”染料。染色体(质)是细胞核内容易被碱性染料染成深色的物质。 在观察植物细胞有丝分裂实验中，常用龙胆紫溶液使染色体染成紫色，也使用醋酸洋红溶液使染色体着红色。二者染色时间都不可过长。 l ％～ 2 ％龙胆紫溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。龙胆紫溶液的配制是将龙胆紫溶解在质量分数为2％的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龙胆紫溶液略呈酸性， l％醋酸洋红本身也是酸性，同样具有碱性的助色基团。 配方中的醋酸是染料的溶剂，在染色时增加了细胞的通透性，利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色 。 此外，改良苯酚品红溶液也可使染色体着色。 4 亚甲基蓝是一种活体染色体 亚甲基蓝是细胞的活体染色剂，0．01％亚甲基蓝对细胞无毒害，亚甲基蓝是一种有机物小分子，在水中离解成亚甲基蓝的阳离子(呈蓝色)和氯离子(无色)，亚甲基蓝阳离子可通过主动运输进入到细菌体内，在酶的作用下被细菌分解成无色的小分子，使蓝色褪去。褪色程度越大，说明细菌越多，水污染越严重，因此可用于水污染程度指示剂。此外，亚甲基蓝是氧化还原指示剂，在有氧的环境中蓝色褪去，可用作氧气检测剂。 5 苏丹红与脂肪鉴定 苏丹 Ⅲ、 苏丹Ⅳ是人工合成的苏丹红系列染料 。常作为一种工业染料，被广泛用于如溶剂 、油 、蜡 、汽油的增色以及鞋 、地板等增光。近年有不法分子用于食品添加剂，对人体有害。 苏丹红为亲脂性化合物。在脂肪类物质中的溶解度大于在其他溶剂( 如酒精 、丙酮) 中的溶解度时 ，染料颗粒便大量进入脂肪类物质的结构内，在脂滴中溶解积累 ， 并吸附在脂肪颗粒结构上 ，苏丹Ⅲ遇脂肪显橘黄色，苏丹Ⅳ遇脂肪显红色。苏丹Ⅳ染液与脂肪的亲和力比较强，所以染色时间应比苏丹Ⅲ短。 6 染色剂的染色与显微镜的使用 如果观察经过染色剂染色的生物材料，如观察洋葱根尖分生区有丝分裂实验时要用较强的光照。而不经染色的生物材料在显微镜下观察时，光线尽可能的较暗些。如观察质壁分离与复原实验时，如果光线太强，不容易观察到液泡。 二 例题分析 例1只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物质或结构的实验是（? ） A.苏丹Ⅲ染色剂观察花生种子子叶细胞中的脂肪 B.龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂 C.健那绿（詹纳斯绿B）染色观察动物细胞的线粒体 D.甲基绿、派洛宁（吡罗红）染色观察动物细胞中的DNA和RNA 解析：本题考查有关染色剂的使用。苏丹Ⅲ染色剂用于观察花生子叶细胞中的脂肪颗粒。观察洋葱根尖分生区细胞的实验在解离时细胞已死亡，甲基绿、吡罗红用于观察DNA和RNA 健那绿染液是专一性的线粒体的活细胞染料，其染色原理是：线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态( 即有色状态)呈蓝绿色 ，而在周围的细胞质中染料被还原成为无色状态。 因此可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。所以只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中线粒体结构。答案为C。 例2下表是根据实验目的，所选用的试剂与预期的实验结果正确的是 ? 实验目的 试剂 预期的实验结果 A 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 醋酸洋红 染色体被染成紫红色 B 检测植物组织中的脂肪 双缩脲试剂 脂肪颗粒被染成紫红色 C 检测植物组织中的葡萄糖 甲基绿 葡萄糖与甲基绿作