MLCK定量检测的双抗体夹心ELISA方法建立.pdfVIP

第36卷第3期 贵 阳 医 学院 学报 VoL36No．3 2011年6月 OFGUIYANGMEDICALCoLLEGE2011．6 JOURNAL MLCK定量检测的双抗体夹心ELISA方法建立水 邸亚男1”，王晋星一3，王猛3，李 兴1，杨国珍1，潘 卫1加+ (1．贵阳医学院医学检验系，贵州贵阳550004；2．贵阳医学院附院I临床生化科，贵州贵阳550004；3．贵阳医学院基础医学(生物技 术方向)，贵州贵阳550004) [摘要]目的：建立定量检测人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的双抗夹心ELISA法。方法：用抗MLCK兔多克 隆抗体包被酶标板，1％小牛血清白蛋白(1％BSA)作为封闭液，抗MLCK羊多克隆抗体和HRP一兔抗羊抗体分别 为包被抗体和检测抗体，建立双抗体夹心ELISA法，并进行了实验条件的优化；同时对新建立方法的灵敏度、精 密度进行了评价。结果：包被抗体和检测抗体最佳工作浓度分别为1：2000和1：200，该方法的敏感性为 5．16 mg／L，低、高浓度样本批内和批间变异系数分别为5．9％、6．1％和16．0％、19．0％。结论：建立了MLCK定 量检测的ELISA方法，其灵敏度和精密度均较好，为人血清MLCK的检测提供了一种简便快捷方法。 【关键词]肌球蛋白轻链激酶；酶联免疫吸附测定；生物技术 [中图分类号]R34—33；R345[文献标识码]A[文章编号]1000-2707(2011)03-0289-03 of Estabilishment Sandwich Double-antibodyEnzyme LinkedImmunosorbentfor AssayQuantitative Detectionof Kinase Mylosin·-fight·—chain DI GuozhenlPANWeil’2 Yananl”，WANGJINXingyi3，WANGMen93，LIXin91，YANG Medical (J．DepartmentofClinicalLaboratoryScience，GuiyangCollege，Guiyang550004，Guizhou，China； Clinical Medical 2．Departmentof BiochemistryLaboratory，theAffiliatedHospitalofGu@ang College， 仇咖ng550004，Gu玉hou，China；3．DepartmentofBiologikalTechnology， Medical Gu咖ng 550004，Guizhou，China．) College，Guiyang a sandwichlinked establish immunosorbent [Abstract]Objective：To