不孕不育患者抗精子抗体检测分析.pdfVIP

VOI．22，洒．9 M哐DIcAL May加ll ‘海南医学2011年第22卷第9期HAⅨANJO切}峭AL ·检验与I瞄床· 不孕不育患者抗精子抗体检测分析 吴忠旺，巫翠萍 (海南医学院附属医院输血科，海南海口570102) 【摘要】 目的探讨抗精子抗体cAsAb)与不孕不育症的关系，评价间接免疫荧光生物芯片技术在检测 00对 AsAb中的临床应用价值。方法采用间接免疫荧光法(IIF)结合生物芯片技术检测750对不孕不育夫妇和1 正常孕期夫妇血清中A5Ab，同时采用ELISA法检测不孕不育夫妇缸Alb。并对结果进行比较分析。结果皿法 不孕不育组舡Ab阳性率为17．2％，明显高于对照组的2．5％，两者比较差异有统计学意义；AsAb阳性标本中。IgG 合率较好，为90．3％。结论血清舡Ab检测有助于临床免疫性不孕不育症的诊断和治疗；间接免疫荧光生物芯 片技术检测抗精子抗体特异性高，既能定性、分型，又能定位，有较好的临床应用价值。 【关键词】 抗精子抗体；不孕不育症；间接免疫荧光法；生物芯片技术 【中图分类号】R698+．2【文献标识码】A 【文章编号】 1003—6350(2011)09一108—02 随着环境的变化，不孕不育病人有日益增多的趋 左右，离心后分离出血清，存入4℃冰箱待测。不孕 势，免疫因素导致的不孕不育症越来越被人们重视。 不育组和正常对照组均采用IIF法检测AsAb；同时用 据世界卫生组织估计，在育龄期夫妇中约10％～20％ELIsA法检测不孕不育组夫妇AsAb。 患有不孕不育症，其中30％一60％与免疫性因素有 1-3．2操作方法间接免疫荧光法(ⅡF)结合生 关，而免疫因素引起不孕机制至今尚未完全阐明，也 物芯片技术检测AsAb取配套加样板，按顺序分别滴 是当前生殖医学研究的热点之一【l】。我们采用间接 加1：32稀释的待测血清及阳性、阴性对照血清各25“l 至加样板的反应区中，盖上已包被人类完整精子的生 免疫荧光法(ⅡF)结合生物芯片技术检测750对不孕 miIl，PBs流水冲洗芯片一次， 不育夫妇和100对正常孕期夫妇血清中抗精子抗体物芯片，室温下反应30 (AsAb)，探讨AsAb与不孕不育症的关系，为临床不然后置PBS中浸泡至少l min，滴加20山FIIc标记的 孕不育的诊断和治疗提供可靠、有效的实验室依据。 抗人免疫球蛋白于洁净加样板的反应区中，从PBS缓 1资料与方法 冲液中取出芯片盖上，避光反应30IIlin。再用PBS流 1．1对象2006年10月至2010年10月在我院水冲洗芯片一次，置PBS中浸泡至少1Tnin，滴加lO“l 生殖中心、妇产科门诊和男科门诊就诊的750对原发甘油／PBs缓冲液于盖玻片上，取出芯片后封片，在荧 或继发不孕不育夫妇(夫妇双方同时接受检查)，性生 光显微镜下观察结果。 活正常，年龄23。45岁，不孕不育年限2～12年，男女 双方均排除生殖道器官器质性病变，染色体正常，女 说明书操作，依据试剂盒提供的判断公式计算结 性无内分泌疾病。对照组为随机选择的我院妇产科 果，150x10‘mU／L为阴性。 lO．5统计软件包 门诊孕期检查的健康夫妇100对，孕龄12—25周，年1．3．