天门冬酰胺合成酶的分子生物学与转基因研究.pdfVIP

内等位基因之问交换率要高于基因组DNA的平均水平。 2．3等位基因特异MVR—PCR 由于MS31A I 44．5％)，未知型56个(占3．8％)。a和t型分布比较均衡，这与小卫星区域MS32的a和t型组成有明显的 差异。 对小卫星区域MS31A5 识别中具有极高的个体识别能力，在实际案件检验中能发挥重大作用。使用等位基因特异的MVR引物， 样品的分离、亲子鉴定等方面有极大的优越性。 参考文献 al 1 AJ，el MinisatellileⅧcoding∞adigindapproachtoDNAtypingNature，1991，354：204—209、 Jeffreys at8second variant 2Neii AJ DiolalDNAtypinghypervafiablelocusbyminisatelliterepeat DL，Jeffmys 3AI-ItlOLlrJAL．etal Allele atrninisatelliteMS205(D16S309)：evidenceforpolasizedvmlabili竹HumMoI diversity 4 XL．etal ofallelie8lnlctureattheD7S21(MS31A)locusindieJapaneseusingminisatei[itevariantIepeatmapping Huang AnaJysis AnnHuntGenet，1996，60：27i～279 6位点扩增片段长度多态性中国珐医学杂志，1993，8(3)：129—132 5陈松，等中国人p33 天门冬酰胺合成酶的分子生物学及转基因研究 林汉明 (香港中文大学生物系) 摘要天门冬酰胺合成酶是调控高等植物内氮运输和储藏的关键酶，过往的生化研究却未能完全解答两个关键 问题：这种酶蛋白的特性及其在植物生理方面所扮演的角色。通过I)NA杂交及酵母菌互补测试，我们从拟南芥菜 (正义及反义)植物来测定它们各自的生理功用。初步结果显示ASNl是控制叶组织内游离的天门冬酰胺水平的主 要基因。 关键词氮代谢天门冬酰胺合成酶转基因植物 1引言 他氨基酸比较起来相对的稳定，再加上具有较高的氮碳比例(2：4)，所以是一个理想的氮运输及贮藏工具。 例如在羽扇豆的发芽过程中，蛋白内86．5％的氮会变成Asn¨…。 扮演很重要的角色，本文将集中报告天门冬酰胺合成酶(As)研究的最新发展，并以拟南芥菜研究获得的数 据为讨论重心。 2天门冬酰胺合成酶的生化背景 As。是190多年前第一个被发现的氨基酸。然而，人类对它的合成机制，直到最近才有较清楚的认识。 105 部，存在着一些以氨为作物的As活性。当植物处于高氨的状态下，Asn可能是氨解毒过程的产物【6J。此外， ②As在体外不稳定；③在植物提取液内有天门冬酰胺酶的活性L91；及④As有数种同工酶。 因此，要进一步了解这种合成酶在生理上的功能和特性，需要采用分子生物学的研究方法。 3天门冬酰胺合成酶的分子生物学研究 cDNA。 为了能在模型植物拟南芥菜内更有效率地进行氮代谢研究，我们利用异源杂交和酵母菌互补测试来取得3 个AS基因的克隆(ASNl，ASN2及ASN3)。 及ASN3则是用Lacmute等L15 出。 ASNl，ASN2和ASN3 都是受光所抑制。这种光的抑制与植物光敏感素有直接的关系。此外，光亦可以通过改变植物内碳代谢物 (主要是糖)的含量来间接影响ASNl的表达。此外，若果将外源糖混在拟南芥菜培养基中，ASNlmRNA的水 进行的HJ。进一步的研究显