实验三果蝇的观察及饲养.pptVIP

实验三????果蝇的性状观察 与饲养管理 生科院:刘福霞 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料 四、实验器具及药品和试剂 五、实验步骤 一、实验目的 了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。 二、实验原理 普通果蝇（Drosophila melanogaster）为双翅目昆虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点： 1.生长迅速，每12天左右即可完成一个世代； 2.繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右，因此在短时间内即可获得大量的子代，便于遗传分析； 3.饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖； 4.加之突变性状多达400以上，且易观多数是形态变异，容察。 三、实验材料 野生型果蝇(红眼、长翅、直刚毛)及几种常见的突变型：如突变型（白眼、小翅、卷刚毛）和突变型（黑檀体）果蝇。 四、实验器具和药品试剂 生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。 乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖（或红糖）。 五、实验内容和步骤 （一）生活史的观察　　 果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段（图1）。 幼虫： 幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，体长可达4～5mm。在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。 果蝇幼虫 蛹： 幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。  果蝇三龄幼虫和蛹： 成虫： 刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。 果蝇成虫： 果蝇生活周期的长短与温度关系密切，30℃以上时果蝇则将不育且濒临死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是20～25℃。 （二）果蝇雌雄性别的鉴别 果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别（图2） （三）几种常见的突变性状　 实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。 （四）果蝇麻醉　 检查果蝇或进行果蝇杂交时，应先进行麻醉，使其保持安静状态。 果蝇具有以下一些特性：一是具有趋光性，二是喜欢向上爬。 掌握了这些特性，我们就能很方便地将果蝇转移到另外一个培养瓶中。 麻醉时，先在棉签上滴上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，将棉塞塞住，平放在桌面上（不能将培养瓶竖立，以免果蝇落入培养基中不便取出）约半分钟，果蝇即被麻醉。 注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈45o角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。麻醉后的果蝇放在滤纸上方便观察。检查后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行处死。 （五）果蝇培养基 　 果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培养基配制方法是： 取一锅盛300ml水，在电磁炉上将水加热烧开，取一个500ml的烧杯，称玉米粉40g、琼脂粉2g，倒入烧杯中加水100ml搅拌均匀。另称白糖30g加入锅中加热溶解，待糖全部溶解后即可倒入玉米糊并将之煮熟。为防止培养基长霉，可加2ml丙酸作为防腐剂。 培养果蝇的饲料瓶，常用的有牛奶瓶、三角瓶、大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞。瓶子和棉塞要高压灭菌消毒。每一瓶大约装2cm厚度的培养基。待冷却后，檫干瓶壁上的水珠即可使用。 作 业 1.如何区分果蝇的雌雄个体？ 2.果蝇麻醉是的注意事项有哪些？ * * * * * * * * * 卵： 卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。 图1 果蝇生活史 1．卵 2．一龄幼虫 3．二龄幼虫