挥发性代谢副产物对甘油发酵抑制作用地研究.pdfVIP

挥发性代谢副产物对甘油发酵抑制作用的研究 谢东明杨燕鸥刘天中 朱丙田赵闵莉刘德华 (中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室 北京100080) 籀要 本之研究了乙醇及其他挥发性代谢副产物对甘油发酵过程的影响．实验表明，体积 采度为2％以上的乙醇主要使残糖消耗的速度明显戒慢，而发酵过程中积幕的其他挥发性代谢副 产物刖对细胞生长和甘油积累有着比较明显的抑制作用． 关键词 乙醇挥发性代谢刮产物甘油发酵抑制作用 1前言 代谢产物抑制是微生物培养过程中的普遍现象。在耐高渗酵母发酵生产甘油的过程中，除甘 油外还将产生许多代谢副产物，如乙醇、简单有机酸、酯类等，这些副产物同样可能对发酵过程 产生抑制作用。Kalle…．Virkarm和Bisping”’”等人发现。耐高渗酵母Scerevisiae发酵生产 甘油过程中产生的乙醇对细胞存活能力及其甘油发酵能力均有显著抑制作用，当乙醇浓度大于 3％时，发酵能力降低40％左右。为此，他们采用真空发酵或通以CO：进行气提发酵以除去发酵过 程中产生的乙醇，提高发酵能力。由于挥发性代谢副产物在甘油发酵中产生较多，而且为了不使 发酵罐内水分过度蒸发，人们通常将已经蒸发带走的水分和挥发性代谢副产物重新冷却收集回反 应罐内，因此，研究这些副产物对发酵过程的影响对传统发酵工艺的进一步优化具有极其重要的 意义。 一 本文通过摇瓶和15L气升式反应器中的实验，分别考察了不同浓度的乙醇及其他挥发性代 谢副产物对耐高渗酵母Candida krusei发酵生产甘油过程的抑制作用。 2实验材料与方法 2．1菌种与培养基 2．1．1菌种中科院化冶所保藏的耐高渗酵母菡株Candid8Krusei(ICM-Y一05)。 2．1．2种子培养基葡萄糖10％，尿素0．3％．玉米浆0．3％，pI-I值为4．0～4．5。 2．1．3发酵培养基葡萄糖25％，尿素2．5％，玉米浆2．5％，pH值为4．O～4．5。 2．2间歇发酵过程 对摇瓶发酵实验，种子液培养24h后按10％接种量接入发酵摇瓶中，并继续发酵96h。对 15 L L气升罐发酵实验，一级种子液先在摇瓶上培养24h后，按10％接种量接入二级种子罐(1 气升式反应罐)，二级种子液培养12h后按8％接种量接入15L发酵罐中，并继续发酵72h，发酵 时反应器保持罐压0．05MPa，通气量为2VVM。 以上所有实验过稃中的培养温度均控制在35±1℃，摇床培养时转速均设定为140r／min。 2．3分析方法 采用血球计数板计数法确定细胞浓度，用菲林定糖法测定葡萄糖浓度，用高碘酸氧化法分析 甘油浓度”1。同时考虑到发酵过程中因水分蒸发造成的体积变化，本文将根据发酵初始体积对所 得浓度进行修正，以利于比较分析。 3结果与讨论 3．1乙醇对甘油发酵过程的影响 6 4 誉 加擂M E ＼ 2 ● 趟 0 牛 长 ’b 景 8 H￡}m 一 ±Ⅱ 6 8 蜊 ， 6 蠼