汉族人群雌激素受体基因多态性地研究.pdfVIP

汉族人群雌激素受体基因多态性的研究 薛延李东王芊董兆文 目的探讨雌激素受体(ER)基因多态性在中国汉族人群中的分布。 【摘要l 方 223例健康妇女和49例男性的ER基因扩增产物酶切，测定ER基因限制性片段长度多 态性(RFLP)。 女性与男性ER基因(PvuII)多态 和0．202；男性分别为O．429、O．469和0．102。结论 性分布无明显性差异。ER基因(PvuII)多态性分布有～定的种族差异性。 【关键词1 雌激素受体基因型 聚合酶链反应多态性 Kb，包括8 人的雌激素受体(ER)基因定位于第6号染色体的q24—q”，长约140 度的关系n ER基因第l内含子单个碱基的变化，在限制性内切酶作用下，识别不同的ER基因的 多态性。他们发现ER基因多态性明显调节腰椎及全身骨密度，推动了遗传基因对骨质 疏松影响的研究。本文采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)方法对 223例北京地区汉族健康妇女和49例男性ER基因型分析。现将分析结果报告如下。 材料与方法 一、对象 1．女性组：体检中随机选择在北京市长期居住的汉族无亲缘关系的健康妇女223例，年龄 39-83岁(平均年龄59．2±10．4岁)，并排除内分泌及肝肾疾病。 2，男性组：上述体检中随机选择的健康男性49例，年龄38—78岁(平均年龄59．8±10．1 岁)。 二、方法 1．试剂：Taq Markers) 及Pvull限制性内切酶均为华美生物工程公司产品；蛋白酶K为Merck公司产品a 所提DNA经紫外线分光光度计定量后，置一20‘C保存备用。 3．引物的设计与合成：引物参照文献‘41设计。由上海生工生物工程技术服务有限公 物： 5’．TCTTTCTCTGCcACCCTGGCGTCGATTATCTGA一3’。 u 4．PCR反应条件：反应总体积为50I，其中含10×扩增缓冲液，10mmol／L u 9．o)，50mmol／LKCl，1％TritonX一100，2．5mmol／L dNTP，0．25 Tris—HCI(PH MgCl2，O．2％mmol／L taq mol／L的引物，300ng模板DNA和2．0U 中。预变性条件为94。C Doc Rad)观察。 色，用Gel 1000型紫外凝胶成像系统(Bio ul PCR扩增产物与5UPvulI内切酶，37‘C水浴3h。 5．扩增产物的限制性酶切：20 酶切产物经1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，一次性成像。ER基因的判断，即缺乏相应酶切位点 为PP型、Pp型为杂合了，pp代表存在相应酶切位点的基因型。 三、统计学处理 按HaMy—Weinberg平衡原理确定样本群体的代表性。各组基因型频率比较采用X2检验。 结 果 一、PCR．RFLP法确定ER基因型 二、同性别ER基因Pvull基凼型舰蜂；分砷 型最少。经X2检验，男女性ER基因频率分布无显著性差异。 表1 ER基因PⅦII基因型频率分布 三、不同人群中ER基因PvuⅡ基因频率分布 表2可见，经x2检验，我国汉族中老年女陛ER基因PⅦⅡ基因型分布频率与日本、美 国、韩国人群无显著性差异。与匈牙利人群有显著性差异(P0．05)。我国汉