小麦白粉病菌闭囊壳萌发技术和对三唑酮的敏感基线研究.pdfVIP

中国植物病害化学防治研究(第二卷) 小麦白粉病菌闭囊壳萌发技术及对三唑酮的敏感基线研究 袁善奎马严明。周明国 (南京农业大学农业部病虫监测与治理基础实验室，南京210095) 摘要在没有DMI类药剂用药历史的湖北利川l山区麦田采集小麦白粉病菌闭囊壳，带回室内萌发．单孢 子堆／样车分离得到61个野生菌株．采用叶段法剥碍每个菌株的D0韩。建立起小麦自耪病菌对三唑配的租 对敏感基线Bc∞=D，1090+0．0048pg／ml。 关键词 小麦白粉病菌}三唑酮；敏感基线 小麦白粉病(病原菌为Blumeriaf。sp．tmw／)是小麦生产上的一种重要病害。国 graminis 际上主要使用DMI类杀菌剂防治该病，但应用不到10年就出现了抗药性问题。中国80年 代初引进三唑酮防治该病，迄今已有20年的用药历史，目前仍是生产上防治该病的主要药 剂。近年来，国内外相继报道，植物病原菌对三唑类杀菌剂产生了抗药性。但抗性水平因各 自泓定方法而异，难以比较。1991年FgJ￥C公布了4种麦类自粉病的抗性钡!l定方法【I]。牢国 马志科“目、马严明[‘]也进行了小麦白粉病菌对三唑酮的抗性测定方法研究，表明叶段法适 合对大量菌样进行测定，且灵敏度高，重复性好。马严明F”最新研究发现，即使采用叶段法进 行敏感性测定，如果药剂处理方式不同则测定结果也有差异，认为采用药液浸叶和培养基加 药的复合处理方式灵敏度更高，重复性更好。本文旨在参考这种易于统一的药剂处理方法， 建立一个小麦白粉病菌对三唑酮的相对敏感基线，作为今后小麦白粉病菌抗药性监测数据 分析的参考资料。 1材料与方法 15％三唑酮WP。张家港七洲农药化工有限公司生产。 1．2供试麦种 1999年5胃从没有功m类杀菌齐j用药历史韵湖j℃省利jll市山区麦田采集小麦自粉病 菌成熟闭囊壳，在4C下干燥保存1个月后，按下面几种方法(A、B、C、D、E)处理闭囊壳； 器器黯徽褰朦差蒹蓉豫点嘉……．。 闭囊壳不经表面消 f灭菌水中漂浮3d一挑至滤纸片上……E 毒一灭菌水漂洗3次 l直接挑至滤纸片上……B ·现工作单位，安蠢省农业科学研究甓檀保所，舍嚣z姗1 褒善奎等小麦白粉病菌闭囊壳萌发技术及对三唑酮的敏感基线研究 105 将带有闭囊壳的滤纸片用灭菌水湿润，并将滤纸片贴在培养皿的皿盖内侧，培养皿中加 入水琼脂培养基(1％琼脂+5腿／nll苯并咪唑)，并插上小麦叶段(叶段倾斜15。左右)，将培 养皿一起放在光照培养箱中(19士1℃)培养，以后每隔5d将皿盖转移至插有新鲜叶段的培 养基上，并保留原来的叶段继续培养，观察是否发病，每培养皿1个闭囊壳，每种处理方法随 机选择60个闭囊壳。让滤纸片经常保持湿润，从第3d开始每天观察闭囊壳是否裂开，直到 没有闭囊壳裂开为止；最后统计每一种处理方法的闭囊壳裂开总数和侵染成功总数(培养皿 中叶段只要发现一个病斑即视为侵染成功)。计算： 侵染成功率cRs-，(％)=篓差嚣蔫{||；}；麟×，oo 选择RSI最高的一种方法对闭囊壳进行萌发，并从发病叶段上随机剪取单孢子堆，将 其孢子抖在麦苗上，隔离保存，作为单个菌株，用作后面测试。 1．4测试叶段准备 叶)完全展开(约15d)时，剪取生长状况基本一致的健康麦苗的第1片真叶，去除叶尖和叶 基部分，剪成2．5～3．Ocm长叶段。 1．5药剂处理方法 参照马严明嘲介绍的药液浸叶和培养基加药的复合处理方法。 培养基不加药作为对照． 1．6测试菌种准备 将分离保存的单孢子堆菌株转接在生长7d左右的麦苗上，待麦苗上长满分生孢子堆 (约8d左右)即可供试。 1．7测试 将用不同药剂浓度处理的叶段斜插(倾斜30’)在与其对应的吉有相同浓度的含药平板 上，叶段正面朝上，每皿lO个叶段，每个培养皿作为一个测试单位。然后将各处理叶段一起 放在接种箱中，取一杯菌种，从接种孔口将孢子吹人，沉降2～3min．每菌株重复4次测定。 分级标准参照文献旧。计算相对防效，将浓度一防效转化为相应的对数一机率值，最后求出 毒力回归曲线方程Y=a+bX，EC*及相关系数r。 2结果与分析 2．1各处理方法的闭囊壳萌发情况