非介体型葡萄糖生物传感器的制作与研究.pdfVIP

E013 非介体型葡萄糖生物传感器的制作和研究 王荣 李建飞 章宗穰+ ．卜海师范大学化学系电化学研究室2002“ 在生物传感器的制作中，技术难点是如何较好地固定生物活性物质． 减少其流失和失活，同时要具有较高的选择性，排除试样中其他物质对测 定的干扰。壳聚糖是一种天然高分子聚合物，其结构和纤维素十舒相似． 差别仅在于纤维素分子链中c．2上的羟摹被氨基取代。巾于其分子q，含有 游离的氨基．从而可以发生交链与接枝、酰化、醚化、酯化、羧甲基化， 烷基化等反应，因而能被赋予功能选择性，同样由于壳聚糖分子中所含的 氡基能进行交联缩合反应，同时又因其为天然高分子化合物．对生物活性 物质的兼容性较好，从而成为一种新型的作为酶和活细胞固定化载体材 料。 本文用壳聚糖作为固定化酶的载体，同时利用壳聚糖功能膜的透过 选择性．研制出性能稳定，抗干扰能力强的新型生物传感器： 一实验部分 1．试剂与仪器： 壳聚糖、葡萄糖氧化酶(s-g衄a公司)、其余化学试剂均为分析纯，实 验溶液均以二次蒸馏水配制。 zF一3恒电位仪、zF一4电位扫描信号发生器、LM20A一100型函数记 87—3型酸 录仪(上海大华仪表厂)、饱和甘汞电极．玻璃电极、PHS 度计(上海华侨仪表厂)， 3．电极的制备： a．把壳聚糖溶于5％的乙酸溶液中，形成1％的壳聚船￡酸(常温过夜)。 b，滴加lul E述溶液于阻微电子技术制作的基体电极上，干燥过夜。 5％的戊 c、用二次蒸馏水冲洗数次，除去表面残留的乙酸，晾干后在2 二．醛溶液中浸泡5分钟，取出晾干。 d、再滴加luL2()oo“m1的葡萄糖氧化酶溶液，常温隙干。 e，用二次蒸馏水冲洗数次，晾干待用。 4．电极性能的测定 传感器测试的系统为：电解质溶液为含olmoInKCl的磷酸盐溶液 (DH=7)，循环伏安法采用三电极体系。传感器性能测定采用恒电 位法。用咆和甘汞电极作参比电极兼作对电极的两电极体系。 实验在搅拌、恒温状态下进行，当基底稳定后，再加八葡萄糖 标准溶液，测量其稳定时响应电流，以总电流与底电流之差怍为传感 器的响应电流，然后根据所测数据进行作图来研究电极的性能． 二实验结果、讨论 1．壳聚糖膜的性能的研究： i【]图l是基体电掇在0—05v扫描范围内，在lmmoIn的铁氰化 钾溶液中的扫描循环f犬安图，和表面涂有壳聚糖膜的基体电极在相同条件 下的循环伏安图，由图中可看出在电极表面涂以壳聚糖噗后，循环伏安图 ‘上海市敦委技术壁畏基金资助项目 educn E—mall‘uan；m“g‘舀1shtu E013 中铁氰化钾的氧化还原峰消失． 这说明铁氰化钾的分子较大，不能通过 壳聚幅膜： 01M 囝】：电概在lmMkFc(cNk图?：电极在50n州Hjo：0lMKd溶液中 Kd溶液中的循环伏安图 的循环伏安图(扫描速度位50mv，sJ a束涂膜b：{象膜后 a：隶豫膜h涂髅后 (2)图2是基体电极在。一o 8v电位范围内，在50衄oVl的过氧化氢溶 液(Kcl浓度为(1lmoⅥ)中扫描和涂膜后在相同条件下扫描所得的图形。 比较两图形可见，涂膜后在氧化峰仍然存在，这说明过氧化氢分子能够通 过壳聚糖膜的孔径，由此，我们不能利用铁氰化钾作介体，制作介体型生 物传感器，我们只能制作非介体型生物传感器。 (3)血液中的尿酸和抗坏血酸对电极的测量有较大的干扰。图3和图4分别 为基体电极涂膜前后分别在￡mmo∽尿酸，5mmol，l的抗坏血酸中扫描所 得的图形。涂壳聚糖膜后，在尿酸、抗坏血欺溶液中扫描后的图形中，