禾本科竹亚植物叶表皮除蜡方法地研究.pdfVIP

电子显微学报J Micro$cSoe 909年 233 禾本科竹亚科植物叶表皮除蜡方法的研究 徐信兰 胡晓颖 卢乃弟 (中科院华南植物研究所电镜室．广州510650) 禾本科植物叶片不同的表皮细胞类型和表皮组织的特征，是分类和系统演化的依据。而禾奉 科竹艰科植物其叶表皮l：多长有蜡被。在应用打描电镜观察研究叶表的皮亚结构时，这堪蜡被影 响了观察的准确性，过去对竹亚科植物叶表皮的观察研究，大多采用光学显微镜进行，少见有用 电镜进行观察研究及有关样品制备方法探讨的报道。本文用丙酮、二甲苯及这两种溶剂不同比例 的混合液浸泡及加用超声波震荡结合的方法处理竹亚科植物的叶片，摸索到-种合适的去除竹 叶表面蜡被的方法，使扫描电镜观察获得好的效果。为竹亚科植物的分类及系统演化的研究提供 可靠的超微结构方面的资料。 材料和方法 fn Vu[garisWamin)、方竹属的方竹(ChimonoDatbusa (Arundinaria amabilis)，取第■片叶中部近中脉处进行实验。 2．样品经蒸馏水清洗后自然干燥．然后将叶片切成长约2～5ram的小方块，不除蜡的对照样品 直接粘台、镀金、上机观察。除蜡样品分圳浸泡于纯丙酮；纯二甲苯；丙酮：二甲苯一1：1，丙酮； JSM T300型扫描电镜观察照相。为研究超声波对除蜡的影响，重新取样选用除蜡效果最好的丙 用超声波对样品分别震荡处理lo～30min，尔后更换新鲜溶剂继续浸泡，最后用同上方法和仪器 将样品粘白、溅射镀膜、用扫描电镜观察其除蜡效果。 结果与讨论 1．通过扫描电镜观察，未除蜡的三种竹叶的叶表皮均被大量鱼瞵状的蜡破所覆盖(图1．3，j)，而 经除蜡处理的竹叶其气孔、刚毛、硅质细胞及表皮等均清晰可皑(图2．4．6)．其彤貌与未处理的 样品相比尢明显变形，可见此除蜡方法简单易行，效果显著。 2．实验所用的各种溶剂均有一定的除蜡效果，但咀丙酮：二甲苯一1：1的混合溶剂除蜡效果最 好，4i用超声波震荡历时七天可将大肚佛竹Ⅱ|表皮的蜡被除净，而方竹只需Ⅱ天半、荼杆竹仅需 五天就可将蜡被除净。用纯二甲苯处理大肚佛竹需15犬斤叮除净蜡被；用丙酮和另外儿种混合 溶剂即使浸泡时间更长也不能将表皮的蜡被除净。 更新新鲜溶剂可大大缩短脱蜡时间且得到较好的除蜡效果，加超声波处理大肚佛竹在丙酮：二 甲苯一1：l的混合溶剂jI需3天、方竹和荼杆竹只需二天就可将叶表皮蜡除净但过度超声波 震荡会使叶片表皮结构损伤甚至破碎(同7)，忻震荡不够4i能将蜡被去除]二净(罔8)。实验证明 趟声波震荡以每天每次小超过20rain为宜。 4．本文仅进一-争属的三个种进行试验，至于它对别的届神的适应范围彳『待世一步试验。 基金项目：中科院广州分院、广东省科学院测试基盘资助项目 电了显做学{＆J 234 8(Sapp)：233～234909年 参考文献 992．11 [】]陈守良等．禾本科叶片表皮微形态H谱．南京：江苏F}学技术出版社，1 [2]事永敬．几种壳?p科植物叶片的除蜡力淡研究．高等农林院校应用电了显微镜技术论文选编，南京·1986． 979．4， [3]李扬攫．禾本科怍物的彤态与角削．：海：』‘海科学技术出版社，1 阿1来除蜡的人讲肚竹叫表面；吲2 已陈蜡的大佛肚竹叶表面；罔3未除蜡的方竹叶表面} 图4已除蜡的方竹叶表【『『『；圈j束除蜡的荣杆竹叶表面．均被大量鱼鳞状蜡坡覆盖．圈6已 除蜡的茶杆11叶表面．表而结构均清晰、干m。日7超声处理水足，蜡被柬祭帛。图8超声处 理过度，Ⅱf表皮结构产生损伤．