琯溪蜜柚自交胚胎发育探究.pdfVIP

136 园艺学进展 (第五辑) 馆溪蜜袖自交胚胎发育研究 王 平 ‘吕柳新 ‘薛勇彪2 黄代青,3‘ ’〔福建农林大学园艺学院，福州350002;2中科院遗传与发育生物学研究所植物遗传与发育实验室 ，北京 100080: 3福建师范大学生物工程学院，福州 350007 摘 要 用石蜡切片技术对馆溪蜜抽 ((CitrusGrandiscv.Gusaximiyou)自交胚胎发育进行了观 察。发现馆溪蜜袖自交出现了两种情形，简称I型和II111oI型在授粉后5d的珠心组织细胞有变 形现象，接着胚囊婆缩，只有外珠被能发育到50d左右才停止生长;II型珠心组织细胞发育正常， 胚囊空腔变大，珠孔端出现有倒卵形的两个细胞或是不规则柱形，胚囊内有游离丝状物产生，随 后胚乳出现萎缩，导致种子的早期败育。由此说明，馆澳蜜抽的自交不亲和表现比较复杂，I型 可能是受精前障碍，不亲和花粉管能到达胚珠，甚至释放出雄配子，但不能受精。n型有可能存 在受精，但从受精开始就孕育着不正常，随后的合子或胚乳发育异常，种子不能发育。因此，19 溪蜜袖瘪籽的大小与不亲和障碍发生的时期有关。 关.词馆澳蜜抽，自X胚胎发育 芸香科中的馆溪蜜抽是具有很高经济价值的果树，但在果实成熟和贮藏过程中，存在一 些如汁胞粒化 (juicesacgram月lation)、裂果 (dehiscentfurit)、裂瓣 (crackedvalve)等问题，严 重影响品质及其商品价值。一些研究表明，导致以上现象的原因可能与它们具有自交不亲和 (self-incompatibility,Sl)特性有关，若无其他品种授粉，果实中仅有败育种子 (种皮)(潘 东明等，1999;吴智云等，1987)0 1材料与方法 1.1供试品种 馆溪蜜抽，种植于福建农林大学植物园。 1.2授粉试验 授粉严格按去雄、套袋、授粉、套袋进行。自交授粉05朵。 1.3 采样时期 从授粉后第5d开始，每隔15d采取幼果8个取出胚珠进行固定。一直到授粉后65d左 右，前后共观察5个时期。 1.4 石蜡切片 将胚珠在改良的卡诺氏固定液 (冰乙酸:70%乙醇二1:3)中固定，接着用爱氏苏木精和 0.1%的碱性品红染色、硫酸亚铁胺分色，后进行脱水、石蜡包埋固定、切片、脱蜡和加拿 大树胶封片，在显微镜下观察胚胎发育状态。 2 观察结果 馆溪蜜抽胚珠倒生卵形，为厚珠心，珠孔端一般有8一20层珠心组织细胞。大多数为单 王平等:箱溪蜜袖自交胚胎发育研究 137 珠心，偶有出现双珠心或三珠心。 2.1授粉后5d胚斑的发育状况 馆溪蜜抽自交5d后，胚囊的发育出现两种不同的现象:一部分是珠心组织一开始就出 现萎缩，胚囊周围个别珠心细胞拉长，呈棒状。胚囊内珠孔端卵细胞和助细胞长，胚囊腔呈 不规则长椭圆形，我们把这类M简称为工型 (图版1);另一部分胚囊周围珠心组织细胞仍正 常，胚囊腔呈规则的椭圆形，在珠孔端卵细胞和助细胞呈倒卵形或柱形，其顶端有少量的带 状丝状物出现，我们把这类型简称为n型 (图版2)0 2.2授粉后20d胚班的发育状况 授粉后20d左右，自交I型从合点端到珠孔端的珠心组织细胞萎缩，区域不断扩大，细 胞壁连成带状，像撕裂的条布一样。胚囊空腔虽有一定的扩大，但与杂交胚囊相比，空腔发 育狭长，且边缘模糊。腔内在珠孔端卵细胞与助细胞也萎缩成一团，还有少量模糊物出现 (图版3);II型胚囊有所发育，空腔稍变大，椭圆形，边缘不甚清晰，囊腔内珠孔端出现有 倒卵形或柱形的两个细胞变得模糊，一些不规则柱形细胞有缩小的趋势，其顶端游离丝状物 增多 (图版4)0 2.3授粉后35d胚班的发育状况 授粉后35d，自交工型胚囊里，除了胚囊周围珠心组织细胞姜缩外，并不影响外珠被的 生长，内外珠被进一步分离，囊腔也会增大，变得更加狭长，囊腔里的物质被萎缩成一团， 这种萎缩反应或许出现得更早一些 (图版5)0n型胚囊周围珠心组织细胞未出现萎缩的现 象，但整个胚珠发育缓慢，内外珠被也会稍有分离，但胚乳生长出现不正常的迹象，表现为 胚乳不是呈游离核状态 (图版6)0 2.4授粉后50d胚班的发育状况 授粉后50d左右，自交工型珠心组织细胞到此时已完全萎缩，外珠被到此阶段也停止了 生长，形成的瘪籽大小在0.5cm左右 (图版7)oII型