通关藤中总皂苷含量测定方法地研究.pdfVIP

第二届中药现代化新剂型新技术国际学术会议 中国·天津．2006 通关藤中总擀量测定方法的研究 朱丽华乔振华何鑫周亚伟‘ (北大世佳研究中心100084) 摘要：目的建立通关藤药材中总皂苷含量测定方法。方法通过对香草醛一高氯酸法、浓硫酸一甲醇法、茴香醛一硫 酸法、高氯酸法四种比色法进行考察比较，最终确定以香草醛一高氯酸法测定通关藤中总皂苷的含量，并对其方法学 进行了系统考察。结果香草醛一高氯酸法测定总皂苷的方法重复性较好，RSD为1．22％，平均回收率98．02％，RSD 为1．63％。结论此方法简便、可靠，可用于通关藤药材的质量控制。 关键词：总皂苷香草醛一高氯酸法比色法 et tenacissima(Roxb．j 通关藤为萝蓐科植物通关藤Marsdenia WightArn．的干燥藤茎。又名 通光藤、通光散、乌骨藤、黄木香等。现代药理研究发现其具有抗肿瘤、平喘、降压、抗菌等药理 作用u2l。通关藤主要含甾体皂苷、孕烷酯类、生物碱、有机酸、多糖、树脂、及色素等多种化学成 分。其中以c。。甾体苷类为通关藤中独特的化学成分，是通关藤抗炎、抗肿瘤、及抗生育活性的物质 基础n¨3。 为加强对通关藤药材的质量控制，需建立一种简便、可靠的总皂苷含量测定方法。本文以C},fl02 (Tenacissoside A)为对照品，分别考察了香草醛一高氯酸法口1、浓硫酸一甲醇法匾111、茴香醛一硫酸 法旧’、高氯酸法田，101四种比色方法，最终确定以香草醛一高氯酸法测定通关藤中总皂苷的含量，为通 关藤药材的质量控制提供可靠的分析方法和依据。 1、仪器与试剂 法计算大于98％)。甲醇、香草醛、高氯酸、茴香醛、浓硫酸均为分析纯。 2、方法及结果 2．1样品的制备 成每ImL含0．16mg的对照品溶液。 2．1．2供试品溶液的制备取药材粗粉约1．59，精密称定，置lOOmL烧瓶中，用50mL70％甲醇回 流提取三次，每次1h，过滤，合并滤液，挥干溶剂，用甲醇定容至lOOmL量瓶中，摇匀，得供试品 溶液。 2．2含量测定方法的筛选 比色法测定总皂苷的含量测定方法多是利用总皂苷与芳香醛一硫酸或高氯酸的显色反应来定量。 目前，较常用的方法有香草醛一高氯酸法、浓硫酸一甲醇法、茴香醛一硫酸法、高氯酸法四种比色方法， 本实验对这4种方法进行了比较。 甲醇，摇匀，在700～300rua波长范围内扫描，见图1。 469 第二届中药现代化新剂型新技术国际学术会议 中国·天津2006 1对照品 2药材提取液 结果表明：两者吸收曲线差别较大，所以排除此方法。 图2。 图2高氯酸法显色所得紫外吸收图谱 1对照品2药材提取液 结果表明：两者的吸收曲线差别较大，所以排除此方法。 摇匀，再放置lOmin，在600～250nm波长范围内扫描，见图3。 图3浓硫酸一甲醇法显色所得紫外吸收图谱 1对照品 2药材提取液 结果表明：两者的吸收曲线相似，均在327nm处有最大吸收，所以可考虑采用此方法测定总皂 苷含量。但直接以此方法测定，所得含量为26．30％，假阳性现象严重。其原因主要为多糖干扰较 大，参考文献哺1对药材提取液进行过D101大孔树脂柱的纯化处理，再用此方法测定通关藤药材中总 皂苷含量，结果为7．57％。 冰乙酸lOmL，摇匀，在700～400nm波长范围内扫描，见图4。 470 第二届中药现代化新剂型新技术国际学术会议 中国·天津200