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菜籽肽抗氧化剂的氧化抑制应用研究
林文浩 阎关洁
浙江大学 生物系统工程与食品科学学院,浙江省 杭州市 310058
摘要:有研究表明,菜籽肽具有很好的抗氧化性,可以作为天然抗氧化剂,但是国内的研究尚处于初级
阶段,缺乏对菜籽肽的分子结构特性与抗氧化活性之间相关性的研究。本课题主要研究提取菜籽分离蛋白、
酶解菜籽分离蛋白、测定不同分子量分布的菜籽肽抗氧化活性。优化了菜籽分离蛋白碱溶酸沉法的提取条
件为碱溶:pH=12,40℃,0.5h,1%NaCl;酸沉:pH=4,40℃。在此条件下,分离蛋白纯度达到50%以上。
使用碱性蛋白酶Alcalase以pH=10,50℃,底物浓度3%,加酶量8%,以此进行酶解,水解度达到32.76%。
分别得到分子量>5kDa,1~5kDa,<1kDa三段不同分子量分布的菜籽肽,分别测定了其DPPH·的清除率,证
明菜籽肽确实具有抗氧化活性,并且在>5kDa中的菜籽肽对自由基的抗氧化能力最强,可达到70%以上。
关键词:菜籽蛋白 ; 菜籽肽 ; 抗氧化性 ; 分子量
Studyintheconnectionbetweenantioxidationanddistributionof
molecularweightofrapeseedenzymedpeptides
LinWenhaoYahFujie
BiosystemEngineeringFoodScienceCollege,ZhejiangUniversity,Zhejiang,Hangzhou,310058
Abstract:Thisprogramisfocusedonthreesteps,separationofrapeseedprotein,enzymingtheprotein,and
analyzingtheantioxidationofrapeseedpeptideinthreedifferentrangesofdistributionofmolecularweight.
Optimizingthewayofseparationmakestheconcentrationofrapeseedproteinuptomorethan50%,andithasbeen
provedthatthepeptideispossessedofantioxidationagainstfreeradical.Thepeptideofdistributionofmorethan
5kDashowsagreatabilityofantioxidation.
Keywords: rapeseedprotein ; rapeseedpeptide ; antioxidation ; molecularweight
第丘届全阑火学,I三创新创、Ik年会
2012年11月 The5th of Nov.2012
Nationalconference onInnt。va‰nand
undergraduate Entrepreneurship
离。 DPPH·4.0 O.0 4.0 O.O
(6)碱溶酸沉根据蛋白质具有等电点特性的原理, 蒸馏水 1.0 4.0 0.0 0.0
通过碱溶酸沉的方法将菜籽蛋白从菜籽液。I|分离m,
95%乙醇 0.0 4.0 0.0 4.0
得到粗蛋fJ。最终确定碱溶的pII为12.00,酸沉的
pH为4.()O。
(二)实验结果 (二)实验结果
经过实验条什的不断调整,蛋白得率明硅l:升, 如图所/J:,随着肽液浓度的一J:升,清除率反而在
蛋白质纯度·叮达到50%以卜-,此粗蛋r]粉未将作为后/1i断F降。这n,能足由丁肽液浓度过高导致菜籽肽之
续实验的样品。
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