乳胶凝集试验检测H5亚型禽流感病毒血凝素抗体地研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会论文集 乳胶凝集试验检测H5亚型禽流感病毒血凝素抗体的研究 喻正军1，金梅林+，徐晓娟，张瑞华，陈焕春 (华中农业大学动物医学院动物病毒室，湖北武汉430070) 摘要：利用原核表达并经过纯化的H5噩型禽流感病毒的血凝素蛋白做为抗原，经碳二亚胺(EDAC)将表达产物和 羧基化的乳胶共价偶联。并对偶联乳胶的蛋白量和偶联时间进行合理选择，建立H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白乳胶 凝集试验的方法。临床检测H5亚型禽流感病毒实验免疫鸡血清126份，同血凝抑制试验相比，其敏感性为87．03％，特 异性为88．8％，两者的符合率为91．7％。结果证明，本文建立的方法可用于H5亚型禽流感抗体水平监测和流行病学 调查。 关键词：禽流感病毒(AIV)；血凝素(HA)蛋自；羧化乳胶；乳胶凝集试验(LAT) 禽流感(AvianInfluenza，AI)是由A型流感病18人感染6人死亡，2004年，越南和泰国又有8例 毒引起的一种病毒性传染病，它于1887年在意大和15例人因感染禽流感而死亡，引起了人们对禽 利首次被发现，现已呈广泛性传播和全球性分布。 流感病毒的广泛关注。临床上，迫切需要能够对禽 自1959年高致病性禽流感首次报道以来，共有5流感病毒的抗原和抗体进行简单快速的检测方法。 起由高致病性禽流感H5N1造成的大暴发，每次都 针对H5亚型禽流感抗体水平检测，有很多种 给养禽业造成巨大的经济损失。随着高致病性禽流 血清学方法，如：血凝抑制(HI)、中和试验(SN)、琼脂 感致病力的增强，其公共卫生意义越来越重大。特 扩散试验(AGP)、免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫 别是1997年香港首次暴发高致病性禽流感导致吸附试验(ELISA)等。上述方法各有所长，但也有其 不足，如：操作技术要求较高，过程繁琐，花费时间 长，有的需要昂贵的仪器设备等。乳胶凝集试验 基金项目：“十五”科技攻关项目 作者简介：喻正军(1977。)，男，湖北人，硕士研究生，主(LAD由于具有快速敏感，简单易行，无需昂贵仪器 要从事动物病毒分子生物学研究． 等优点，已广泛用于多种动物疾病抗原抗体的检测 通讯作者：Tel：+86-027 和流行病学调查。 Fax：+86_027 本文建立H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白乳胶 E—mail address：hzavetC印ublic．wh．hb．cn凝集试验，是以羧化的聚苯乙烯乳胶为载体，采用 {娩f{!；带避矫趟‘尔≈寥帘出乔出筇{!绵{!绵出：替出夼出看心矫也乖出尔出乖出带出零出带蝌乔出尔出帘出乖出符北秘蝌看池乖出科物斛绵出礴躺礴擎帘出辩％姑秘场抟蚴趟铂过钚 和方向。目前为止，禽流感病原学诊断方法主要还 是这给我们敲响了警钟，H7亚型禽流感究竟离我 是病毒分离鉴定，该方法最为敏感、直接、有效，但 们有多远，我们如何来加大监测力度防止可能出现 是费时费力，周期长，而且不利于在基层单位使用； 的H7亚型禽流感病毒的流行，这是摆在我国当前 研究的一个重要课题。基于以上原因，我们建立该 而病毒RT—PCR方法也只是近期内兴起的一个新 型诊断方法，具有实时、快速的特点，但是对实验条 H7亚型高致病性禽流感病毒抗原捕获ELISA检测 件有着较为严格的要求，在现地和基层单位要大面 方法，以期为我国H7亚型高致病性禽流感病毒感 积推广使用还有一定的难度。 染和流行的监测、试验室的诊断与检疫提供一种有 尽管在我国一直只有H5亚型禽流感病毒的流 效的手段。 行，没有H7亚型禽流感的传播，但是在2003年从 我国北京地区分离到了一株低致病性H7亚型禽流 参考文献【略】 感病毒，尽管没有在大面积的地域内造成影响，但