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星点设计-效应面法优化亚微乳疫苗佐剂处方 蔡伟惠，邓家华，金方∗ 上海医药工业研究院，上海呼吸系统药物工程技术研究中心，上海 200437 摘要：目的通过星点设计-效应面法优化亚微乳佐剂处方。方法以浊度法测定角 鲨烯所需乳化剂 HLB 值；以水数法测定卵磷脂和 Solutol HS 15 的HLB 值；以 卵磷脂+Solutol HS 15 用量（X ）、卵磷脂与 Solutol HS 15 用量比值（X ）、油酸 1 2 钠用量（X ）为考察因素，以平均粒径和浊度的综合指标OD 值为考察指标，建 3 立二次多项式模型，根据模型绘制效应面和等高线图，确定优化处方，最后进行 验证。结果角鲨烯所需乳化剂 HLB 值约为 10；卵磷脂的HLB 值为 7.4，Solutol HS 15 的HLB 值为 12.5；优化处方中卵磷脂为 0.6% （w/v ），Solutol HS 15 为 0.6% （w/v ），油酸钠为 0.025% （w/v ），优化处方指标的预测值和测定值非常接近， 二次多项式模型置信度高。结论采用星点设计-效应面法，得到了二次多项式模 型，实现了亚微乳佐剂的处方优化。 关键词：亚微乳；佐剂；星点设计；效应面法 亚微乳由水相、油相和两亲性化合物组成，外观不透明，呈浑浊或乳状，属 热力学不稳定体系。通常亚微乳的粒径在普通乳剂（1～1000 μm ）与微乳之间， 粒径为 100～1000 nm。目前亚微乳作为疫苗佐剂的研究已进入临床应用阶段， 上市的佐剂有 MF59 和 AS03 。其中 MF59 是除铝佐剂外首个用于人类的新型佐 剂，含 5% （w/v ）鲨烯、0.5% （w/v ）吐温80、0.5% （w/v ）司盘85，目前已批 准用于 H1N1 亚单位疫苗（Fluad ），大流行流感疫苗（Focetria ），禽流感疫苗 [1] （Aflunov ）等疫苗中 。 本实验在前期研究的基础上，采用 5% （w/v ）角鲨烯为油相，安全性更高的 乳化剂卵磷脂、聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15）和油酸钠为复合乳 化剂，采用星点设计- 效应面法优化处方，制备亚微乳佐剂。星点设计 (Centralcomposite design)是在析因设计(Factorial design) 的基础上，加上星点(Star point) 及中心点(Central point)而形成的实验次数较少、并可进行线性或非线性拟 合的实验设计方法，已经在制剂处方和工艺的优化中得到广泛的应用[2] 。我们采                                                               ∗金方，女，研究员，博士生导师，从事新剂型及其产业化研究。联系电话: ( 021)146， E-mail: jfsipi@163.com 。 蔡伟惠，男，博士，主要从事纳米注射剂的研究。联系电话: ( 021)133，E-mail: cwhsipi@163.com 。  用三因素五水平的星点设计，结合效应面法优化处方。 1 试剂与仪器 1.1 试剂和试药 角鲨烯（美国 Sigma-Aldrich 公司，99% ）；精制蛋黄卵磷脂（德国Lipoid 公 司）；油酸钠（德国Lipoid 公司）；Solutol HS 15 （德国巴斯夫公司）；吐温 80、 吐温 60、吐温40 、吐温20 、司盘 80、司盘 60、司盘40 、司盘20 （分析纯，均 购自 TCI 公司）；N ，N-二甲基甲酰胺、苯为分析纯，纯化水为自制。 1.2 仪器 FB 超高压均质机（上海励途机械设备公司）；FA25 Model 高剪切分散乳化 机（上海弗鲁克公司）；Super-Nuova 热板磁力搅拌器（赛默飞世尔科技有限公司）； Nano-ZS 90 粒径电位分析仪（英国马尔文仪器有限公司）。 2 实验方法 2.1 角鲨烯所需乳化剂 HLB 值的测定