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蛋白质的α-螺旋结构: 以肽单元为单位,多肽链依顺时针方向形成紧密的右手螺旋,R基伸展向外,外观形状为棒状。每隔3.6个氨基酸残基,螺旋上升一圈,螺距为0.54nm。
蛋白质的β-折叠结构:若干肽段或肽链几乎完全伸展的平行排列,肽链的主链呈锯齿状折叠构象,外观为一片状物。侧链位于锯齿结构的上下方。
结构域:多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区,它是相对独立的紧密球状实体。
超二级结构(super-secondary structure):由二个或三个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象
盐析(salting out)(salting in):是将中性盐加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,导致蛋白质沉淀; 低浓度时,中性盐可以增加蛋白质溶解度现象。
分子伴侣:在蛋白质加工、折叠形成特定空间构象及穿膜进入细胞器的转位过程中起关键作用的一类蛋白质
顺反子(cistron):即结构基因,为决定一条多肽链合成的功能单位denaturation)与复性(renaturation):在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程;
变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链重新缔合成双链——复性
退火(annealing):热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火(annealing)
增色效应(hyper chromic effect):由于变性或降解引起DNA紫外吸收增加的现象称增色效应
减色效应(hypo chromic effect):DNA复性时紫外吸收减少的现象,也称低色效应。
分子杂交:标记的探针DNA变性后与变性后的靶基因通过碱基互补配对结合,形成杂种分子的过程
不对称转录(asymmetric trancription):DNA链是有极性的,RNA聚合酶以不对称的方式与启动子结合,使得转录只能沿着一个方向进行。对一个基因而言,互补链中只有一条链被转录成RNA。reverse transcription):以RNA为模板,依靠逆转录酶的作用,以四种脱氧核苷三磷酸(dNTP)为底物,产生DNA链。Okazaki fragment):DNA复制时复制方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制的链称为随从链。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。
4.DNA分子二级结构有哪些特点?
答:(1)两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴缠绕为右手螺旋。
(2)碱基位于内侧,磷酸和核糖在外侧,通过3’,5’-磷酸二酯键构成骨架。碱基平面与纵轴垂直,糖环平面与纵轴平行。
(3)双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角36°,每圈含10个核苷酸,螺距3.4nm。
(4)两条核苷酸链依靠碱基间形成的氢键而结合。
A=T G≡C
(5)碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。但根据碱基配对原则,一条核苷酸链序列可决定另一条互补链的序列。
6.何谓熔解温度?熔解温度的大小与哪些因素有关?
答:
DNA变性时,OD260达到最大值的50%时的温度称为 DNA的解链温度或融解温度(Tm)。
1.链的长度:链越长,需要的 能量多才能解链;
2.碱基成分:GC含量高,能来越高;
3.化学环境:单价阳离子稳定双链;甲酰胺,尿素破坏双链
8.RNA功能的多样性
RNA主要负责DNA遗传信息的翻译和表达,其包含三种RNA:mRNT 、tRNA、 rRNA。
mRNA功能:将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地 – 核糖核蛋白体,主要在转录过程中承担信使的作用。
tRNA的功能:
结合活化氨基酸( 3′-CCA-OH ),
搬运氨基酸到核糖体;
识别mRNA密码子。
参与蛋白质的翻译。
rRNA是核糖核蛋白体的主要组成部分;功能与蛋白质生物合成相关
10.DNA复制的过程
DNA复制主要包括引发、延伸、终止三个阶段
复制(replication)是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。
复制的起始复制的引发(Priming)阶段包括DNA复制起点双链被DNA解旋酶解开,通过转录激活步骤合成RNA分子,RNA引物形成后,由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3-OH端而进入DNA链的延伸阶段。
1. DNA解开成单链,提供模板。
合成引物,提供3(-OH末端。复制的延复制的延指在DNA-pol催化下,dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上,其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。DNA新生链的合成由DNA聚合酶Ⅲ所催化,然而,DNA必须由螺旋酶在复制叉处边移动边解开双链
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