特异性DNA序列建立种特异性FQ-PCR快速检测肠炎沙门氏菌.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 特异性DNA序列建立种特异性FQ．PCR快速检测肠炎沙门氏菌 邓树轩1，程安春1’2，3．，汪铭书1P，曹平1，朱德康u，陈孝跃1 (1．四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心，四川雅安，625014；2．动物疫病与人类健康四川省 重点实验窒，四川雅安，625014；3．四川农业大学动物微生态工程研究中心，四川雅安625014) 在舾DNA含量为9×los一9x104copies有较好的线性关系；检测晒DNA模板的灵敏度为4copies／1．1L， 检测距’细菌数的灵敏度为6cFlJ，InL；特异性试验表明只对船’基因组呈阳性反应。分另q应用该技术 和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便，结果显示两种 高于细菌分离。研究结果表明，该方法快速、灵敏、特异。重复性好且能实时定量检测，可用于艇’ 分离鉴定、5E感染疑似病例检测、艇体内动态分布规律研究及其分子流行病学调查。 关键词：肠炎沙门氏菌(距)，荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)，种特异性 basedona identificationofSalmonellaenterifidis FQ—PCR Rapid specifc am DNA plifyingspeciesspecificsequence DENG MedicineofSichuan diseaseResearch AgriculturalUniversity,Yaan625014，China；2． (1．Avian C就ater,CollageofVeterinary of ofAnimalandHumanHealthofSichuan C卉lter KeyLaboratory Diseases Province，Yaan625014，China；3．Research Animal Agricultural Microe,cologicalEngineering,Sichuan Abstract：Basedonthe DNA ofSalmonellaenteritidis∞)fromGenBank，a species sequence specific of whichshowed1 afteraconventionalPCR a pair specificprimer 30bpfi-agment amplifying，and based fluorescent were real-time，fluorescence designed．Then，aspecies·specific TaqMan-probe 6Ⅱ腰detectionWas could chain initially．It quantitativepolymerasereaction(FQ-PCR)methodd