NaCl 培养液对植物根尖有丝分裂的影响.pdfVIP

长江大学学报(自然科学版) 2009年9月第6卷 第3期：农学 JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit) Sep．2009，Vo1．6No．3：AgriSci doi：10．3969／j．issn．1673—1409(S)．2009．03．014 NaCI培养液对植物根尖有丝分裂的影响 王 燕 ，孙晓东 ，龚 坚，王 瑁 ，余明华 (郧阳医学院基础医学研究所，湖北十堰442000) [摘要]以洋葱根尖、大蒜根尖、蚕豆根尖为材料 ，分别用 50、150、250mmol／L 的NaCI培养液对分生区细胞 进行 72h培养 ，分析 NaC1培养液对植物根尖细胞有丝分裂指数及微核 的影 响。结果表 明，不 同浓度 的 NaC1培养液对植物根尖作用 72h后，植物根尖细胞 中期分裂指数和 中期染染色体形态均有不 同程度 的影 响，有丝分裂指数随着 NaC1处理剂量的增加而下降，微核率随着NaC1处理剂量 的增加而升高，且一定浓度 的NaC1影响植物细胞有丝分裂的速度 ，当浓度较低 时促进分裂 ，浓度较高时则抑制分裂。 [关键词]植物根尖 ；NaCI培养液；有丝分裂 ；分裂指数；微核 [中图分类号]Q943 [文献标识码]A [文章编号]1673—1409(2009)03一S045一O2 有丝分裂是植物细胞进行增殖的主要方式 ，在植物细胞有丝分裂过程 中，染色体的形态和结构表现出 一 系列规律性的变化 ，尤其是细胞分裂中期染色体的收缩程度 良好 ，适于进行染色体形态数 目的观察及识 别。细胞有丝分裂指数受培养液 、预处理液及温度等多种因素的影响。NaC1对植物细胞的毒害效应是抑 制植物细胞分裂 ]。本试验采用不同浓度的NaC1培养液对洋葱根尖 、大蒜根尖 、蚕豆根尖进行培养，分 析 NaC1培养液对植物根尖细胞有丝分裂 M 期分裂活动的影响 ，探讨 NaC1培养液对植物根尖有丝分裂 指数影响及细胞微核率的影响。 1 材料与方法 1．1 材料及预处理 挑选无破损且形态均匀当年的洋葱、大蒜 ，削去老根 ，先置于盛有蒸馏水 的烧杯上培养 ，室温 (22℃) 进行萌芽 ；蚕豆先用 0．1 HgC1：消毒，蒸馏水冲洗干净 ，置于中空的网上 ，将芽点处向下置于盛有蒸馏水 的烧杯上 ，隔 日换水 ，2～3d根尖长出，将其移人盛有不同浓度的NaCI培养液烧杯中继续培养 72h，处理 液浓度为 50、150、250mmol／L，对照组用蒸馏水处理 。72h后在植物细胞分裂的高峰期 ，即上午 8：OO～ 1O：o0，剪取 0．5～1．0cm长度的根尖 ，立即放入卡诺氏固定液 (纯酒精 ：氯仿 ：冰醋酸一6：3：1)中固定 2～3h，然后依次在浓度梯度 95％、85 、80％的酒精 中分别浸泡 5min后 ，转入 70 的酒精 中保存备 用 ，。，。 1．2 制片方法 将根尖放入盛有 1mol／LHC1的烧杯中，6O℃恒温水浴箱解离 5min，水洗后用改 良碱性品红染色 1O～15min，常规压片 ，供镜检 。 1．3 镜检统计方法 (1)有丝分裂指数的统计方法 每剂量组观察 6个根尖 ，每个根尖统计 500个 以上细胞 ，每组统计 3 000个以上细胞 ；分裂细胞包括前、中、后 、末期的所有细胞 ，并计算有丝分裂指数 (有丝分裂指数一分裂细 胞数 ／观察细胞数 ×100 )。 (2)植物细胞微核率的统计方法 每剂量组观察 6个根尖 ，每个根尖统计 500个 以上细胞 ，每组统计 3000个 以上细胞 。以1000个细胞中出现的微核数表示微核率。 [收稿日期32009一O4—23 [第一作者简介]王 燕(1972一)，女，湖北十堰人，实验师，主要从事组织化学与形态学的研究 长江大学学报(自然科学版) 2009年 9月 2 结果与分析 2．1 不同浓度的NaCI培养液对根尖细胞有丝分裂指数的影响 通过光学显微镜观察发现 ，不同剂量的NaCI均对植物根尖细胞有丝分裂产生抑制作用 。随着 NaC1 浓度的增加 ，植物细胞有丝分裂指数明显降低。其中250mmol／L的NaC1对植物根尖有丝分裂抑制作用 最大，而 150mmol／L的NaC1对植物根尖有丝分裂抑制作用次之，50mmol／L的NaC1对植物根尖有丝 分裂抑制作用最小 (表 1)。