高通量筛选 定量PCR微阵列 人肝细胞癌 双向凝胶电泳 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 蛋白质印迹论文.docVIP

肝细胞癌论文：抗肝癌及逆转MDR中药成分多靶点筛选方法建立的实验研究 【中文摘要】在转录水平上建立抗肝癌及逆转MDR中药的多靶点高通量筛选方法。方法采用体外培养人肝癌细胞BEL-7402及其耐5-氟尿嘧啶细胞Bel-FU,MTT法检测Bel-FU的多药耐药性、5种中药成分的(槲皮素、EGCG、老鼠簕生物碱A、乙酰老鼠簕生物碱A、龙血素B)细胞敏感性以及药物浓度依赖的逆转耐药性;选择与肝癌发生发展相关途径的42个功能基因,采用实时定量PCR微阵列技术检测各中药成分作用于耐药细胞前后的差异表达基因,实时定量PCR检测槲皮素、EGCG、乙酰老鼠簕生物碱A分别作用于Bel-FU后H-ras、MDR1基因表达,以验证微阵列结果。结果Bel-FU对5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、阿霉素、柔红霉素的耐药指数分别为:89.6、3.4、37.2、16.5、3.7倍。槲皮素、EGCG、老鼠簕生物碱A、乙酰老鼠簕生物碱A、龙血素B对Bel-FU的IC50值分别为193.9μM、1230.8μM、507.8μM、244.9μM、163.7μM,对Bel-FU的IC10值分别为58.2μM、159.5μM、75.3μM、64.7μM、25.8μM。43.6、87.2、130.8μM的EGCG对... 【英文摘要】To establish a high throughput and multi-target