海藻玉壶汤中海藻和甘草不同比例配伍对甲状腺肿大大鼠模型甲状腺TPO、Tg+mRNA表达的影响.pdfVIP

海藻玉壶汤中海藻与甘草不同比例配伍对甲状腺肿大大鼠模型甲状腺 ml州A表达的影响 TPO、Tg 李怡文 f雪钟赣生柳海艳刘云翔高源 (北京中医药大学，北京lO0029) 海藻与甘草配伍属中药“十八反”配伍禁忌范畴。作为中药配伍禁忌的代名词，“十八反”从金元 时期沿用至今已有近千年的历史。传统中医认为反药同时应用会产生剧烈的毒副作用，因此限制了 反药组合的临床应用．然而从诸多文献及临床实践看，持不同意见者亦不乏其人，海藻和甘草配伍 屡见不鲜。纵观古代医籍，同刚海藻、甘草的方剂达30余首之多，如孙思邀《备急干金要方》之“大 补气方”，李东垣《兰室秘藏》之“散肿溃坚汤”，王肯堂《证治准绳》之“防风羌活汤”，陈实功《外 科正宗》之“海藻玉壶汤”、“通气散坚丸”，就连政府组织编写的医籍中也有此类方剂，如《太平圣 惠方》之“内消昆布散”，《圣济总录》之“茯苓汤”，《医宗金鉴》之“消核散”等。从现代临床应用角度 看，亦有海藻、甘草配伍治疗内分泌科(甲状腺)、妇科、男科、皮肤科等多种疾病…。 以往对于反约组合的研究，多是考察了海藻和甘草在生理状态卜．，单独应用两味中药所产生的 毒性【21。然而，临床上“相反”药物配伍伎用多丁特定的病理条件’卜．，且是在复方中应用的。因此，本 课题以明代《外科正宗》中经典方剂海藻玉壶汤为切入点，人鼠甲状腙肿人病理模型为载体，基于 “973”项目组均匀设计要求，从方约结合的角度，探讨方中“海藻与甘草”反约约对不同配比对甲状腺 肿人人鼠模型的生物学效应的影响。通过放射免疫方法测定血清中甲状腺激素水平、病理性形态学 观察及分子生物学水平从而探讨海藻甘草不同比例配伍治疗甲状腺肿人的作川机理。课题组研究表 明，含海藻甘草不同配比的海藻玉壶汤对丙硫氧嘧啶(PTUl引起的人鼠血．清中甲状腺激素水平异常及 甲状腺病理形态改变有不同样度的同调作川(文章另行发表)，本文主要对海藻玉壶汤|亓1调甲状腺激 素水平异常的机制进行探讨。 丙硫氧嘧啶(PTu)是通过引起血清中甲状腺激素水平u卜．降，TSH反馈性增高，进而导致甲状腺 肿人形成的甲状腺激素干扰物”J。对|丁：丙嘧引起甲状腺激素水平的卜．降，国内外学者通常认为与其 J，也有学者认为其过程还涉及到丙嘧对 抑制甲状腺过氧化酶(fhyroidperoxidase，TPO)的活性有关m 甲状腺球蛋白(thyroglobu】in，Tg)合成的抑制，与PTu造成甲状腺滤泡细胞粗面内质网损伤有关【6】o 由此可见，因此PTU对甲状腺激素水平的干扰机理，有待进一步的研究。丙硫氧嘧啶引起的甲减导 致TSH反馈性升高，义可通过信号转导途径促进TPo、Tg等基冈的转录而具有代偿意义【7’8l，鉴于 此，本次实验建立PTU致甲状脓肿人的人鼠动物模型，在海藻玉壶汤中海藻与甘草不同配伍比例情 况卜．，从基因转录水平探讨研究海藻K壶汤对甲状腺增生中特异性基冈TPO与Tg的表达情况及意 义。以期在分子生物学水平为海藻甘草不同配比的海藻玉壶汤与对甲状腺功能改善的关系上提供科 学依据。 1材料与方法 1．1 实验动物 公司提供，许可证号：SCXK(京)2006．0009。 1．2实验药材 生甘草产白’j：夏灵武，生产批号为100710；炙甘草产地、批号同生甘草，按照2010版《中国 159 药典》炮制标准，由北京中医药大学中药学院炮制教研室杨蕾老师指导完成，其中蜂蜜选用百花牌 枣花蜂蜜，由北京自花蜂蜜有限公司提供，批号海藻产自山东烟台，生产批号为皖 以上药物经南京中医药大学段金廒教授鉴定均为合格的中药饮片。 法半夏产自贵州长顺，生产批号为100701；贝母产臼浙江潘安；连翘产自山西，生产批号为 当归产自甘肃，生产批号为1012052；海带产自山东青岛。以上药物均购自北京双桥燕京中药饮片 厂，经北京中医约大学基础医学院李伟老师鉴定均为合格的中药饮片。 复制模型药物为丙硫氧嘧啶片，由广东华南药业集团有限公司提供，生产批号100704】，使用 配制为2ug／ml／1009药液。 1．3药物的煎煮 1．3．1 海藻、甘草配比剂肇的选择 范围，高限为1／2半数致死量，低限为药典剂量的低限。按动物体表系数算法得大鼠给药的